马凤巧 (南阳医学高等专科学校基础部生理教研室,河南 南阳 473000)
目前阿尔茨海默病(AD)的防治已成为全球较为热门的研究课题。黄精属传统中药,有补中益气,除风祛湿,安五脏延年等作用,近年来有较多文献报道黄精具有提高记忆力的药理作用〔1,2〕。本实验以D-半乳糖致 AD大鼠模型,研究黄精对 AD大鼠海马组织Caspase-3蛋白表达的影响,探讨黄精提高AD大鼠学习记忆能力的作用机制。
1.1 实验动物 雄性健康SD清洁大鼠40只(由河南医学动物实验中心提供),2~3月龄,体重(200±20)g,所有大鼠同室分笼标准条件下饲养。
1.2 方法
1.2.1 分组 在标准环境下适应1 w后,根据实验设计将动物随机分为对照组、模型组、黄精低、高剂量组,每组10只。但实验后各组动物均有缺失。
1.2.2 药品与试剂 黄精购于河南省南阳市医药公司;D-半乳糖购于上海试剂二厂,批号20050422;一抗:Caspase-3兔抗鼠抗体,武汉博士德生物工程有限公司。
1.2.3 给药方法 模型组、黄精低、高剂量组用3%D-半乳糖生理盐水溶液按150 mg·kg-1·d-1颈后部皮下注射,对照组皮下注射等量的生理盐水;同时黄精高、低剂量治疗组分别按10、5 g/kg的黄精水煎剂灌胃,模型组和对照组给予等量的生理盐水灌胃。
1.3 检测方法 6 w后进行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力和空间探索能力,实验后将大鼠断头处死,在低温冰盘上取出海马组织,通过免疫组化(二步法)检测海马组织中Caspase-3蛋白的表达。采用DMR+Q550型病理图像分析系统进行图像分析,每组次选取8个视野,采用统一的照相倍数采样,对其染色强度进行分析。……