EMIT法与HPLC法测定人血浆中环孢素A浓度的比较研究

宋晓勇，张永州，吴先闯，王云香，吕维玲，杨磊（.河南大学淮河医院，开封市 475000；2.河南大学药学院，开封市 475000）

环孢素A（CsA）是临床上常用的免疫抑制剂，主要用于预防器官或组织移植所发生的排斥反应及重型再生障碍性贫血。因其有效血药浓度范围窄、患者个体差异大[1]，因此对临床应用的CsA进行血药浓度监测可有效地提高疗效并减少毒副反应的发生[2]。目前，临床上测定CsA血药浓度的方法有免疫法和高效液相色谱（HPLC）法。酶放大免疫法（EMIT）是一种均相酶免疫分析技术，检测原理是样本中的药物与用酶标记的药物竞争抗体结合位点，与抗体结合后，酶的活性降低，可以根据酶的活性来确定样本中待测物的浓度。该法样品前处理简便，自动化程度高，测定周期短，样本量大。本试验收集本院服用CsA的肾移植患者稳态谷浓度血样20份，分别用HPLC法和EMIT法进行测定，考察2种不同测定方法的区别和相关性。

1 材料

1.1 仪器

LC-10A高效液相色谱仪（日本岛津公司）；美国Vival_E临床化学分析系统（荷兰Vital Scientific N.V.公司制造，美国Dade Behring公司销售）；XH-2000-I型涡旋混合器（天津医疗器械厂）；LD5-2A型高速离心机（北京医用离心机厂）；电热水浴箱（北京医疗设备厂）。

1.2 试药

CsA对照品（中国药品生物制品检定所，批号:130495-200202，纯度:99.5%）；内标:环孢素D（CsD）对照品（福建生物药品检验所，批号:0104006-416，纯度:99.0%）；EMIT法测定试剂:Emit 2000 CsA前处理液（批号:6R719UL-C1）、Emit 2000 CsA定标液（批号:6R119UL-C2）、Emit 2000 CsA检测试剂（批号:6R079UL-C2）、Emit 2000CsA质控（批号:7190）均购自美国Dade Behring公司（丽珠试剂公司销售）；乙腈、甲醇为色谱纯，乙醚、正庚烷、正己烷为分析纯；纯净水由本医院血液透析科制备。……