李晓云,梁立全(广西贺州市人民医院,贺州市 542800)
大肠埃希菌是肠杆菌中最常见的致病菌,尤其是产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的多重耐药性,给临床抗感染治疗带来很大困难。2007、2008、2009年我院大肠埃希菌的检出率分别为19.6%、20.0%、19.3%,占革兰阴性菌的31.1%、37.0%、36.9%,明显高于国内平均水平(28.0%)[1]。笔者对2007-2009年我院住院患者分离出的557株大肠埃希菌产ESBLs情况和对常用15种抗菌药物耐药率进行分析,为临床抗感染治疗提供用药依据。
1.1.1 标本来源。取自于2007-2009年我院住院患者细菌培养的送检标本,包括痰、尿液、血液、脓液、分泌物及腹水等。
1.1.2 质控菌株。大肠埃希菌ATCC 25922。
1.1.3 培养基和试剂。MH培养基,购于杭州天和微生物试剂有限公司,细菌鉴定试剂购于法国生物梅里埃公司。
1.1.4 药敏纸片。氨苄青霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、环丙沙星、庆大霉素、阿米卡星、呋喃妥因、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、依诺沙星、左氧氟沙星,以上纸片和ESBLs检测试剂均购于杭州天和微生物试剂有限公司。
1.2.1 操作方法。细菌分离与鉴定、标本接种按《全国临床检验操作规程》第三版操作。
1.2.2 菌种鉴定。采用常规方法及ATB细菌鉴定系统进行细菌鉴定。
1.2.3 药敏试验方法。采用纸片扩散法(K-B法),其方法及结果判断按美国临床实验室标准化协会(CLSI)最新标准进行。
1.2.4 ESBLs的检测。用双纸片法,在MH药敏平板上贴头孢他啶(30μg)、头孢他啶/克拉维酸(30μg/10μg)和头孢噻肟(30μg)、头孢噻肟/克拉维酸(30μg/10μg)。2组合中任何一组加克拉维酸比不加克拉维酸的药敏纸片抑菌环直径相差≥5mm即为产ESBLs。……