励银智 宋月轻 王健
习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指连续发生两次或两次以上的自然流产,其病因复杂,50%的患者病因不明。Th1/Th2细胞因子学说已成为近年研究热点。Th2细胞因子诱导母体产生免疫耐受,有利于妊娠的建立及维持,本研究通过免疫组化方法检测白介素-6(IL-6)在正常早孕及习惯性流产患者绒毛组织中IL-6的表达,探讨的表达情况与习惯性流产发生的关系。
1.1 一般资料 研究组:为2009年10月至2010年10月就诊于门诊的习惯性流产患者17例,平均年龄(24.4±2.0)岁;平均孕(7.4±2.6)周;流产2次10例,流产3次4例,3次以上3例;除外染色体、解剖、内分泌异常、感染及内生殖器解剖异常等因素,经临床病史、体征、B超、血人绒毛膜促性腺激素(HCG)检测确定已经发生难免流产或稽留流产者。对照组:为同期在门诊就诊的要求进行人工流产的正常女性20例,平均年龄(22.8 ±2.6)岁;平均孕(7.0 ±1.9)周;B 超示有胚胎心血管搏动,无不良妊娠史。2组一般资料有均衡性。
1.2 主要试剂来源 试剂一抗兔抗人IL-6多克隆抗体购自武汉博士得生物工程公司,免疫组化SP试剂盒,DAB显色剂均购自北京中山生物技术有限公司。
1.3 标本采集及制备 2组于人工流产术或清宫术后留取绒毛组织,0.9%氯化钠溶液冲洗干净后,用10%中性甲醛40℃固定24 h以上,进行常规脱水处理后,二甲苯透明,浸腊,制成石蜡包块。
1.4 免疫组化测定绒毛组织中IL-6的表达,严格按照SP试剂盒说明进行染色。用已知阳性标本做阳性对照,用PBS代替一抗做阴性对照。
1.5 实验结果判定 以细胞浆内出现棕黄色颗粒视为阳性表达。……