银杏叶提取物对大鼠重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用及机制研究

何 彩,王 煊,邓明明,周正端,刘 宏,屈小平

(泸州医学院附属医院消化内科,四川泸州646000)

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是临床常见的危重症之一,随着生活水平的提高和饮食结构的改变,其发病率有所上升,死亡率居高不下。SAP并发肾脏损伤是SAP死亡率高的重要因素之一。目前有关炎症介质在SAP发病机制中的作用逐渐受到关注,但SAP肾损伤与炎症介质之间的关系尚未明了,因此本研究拟通过观察Toll样受体4/核因子κ B(toll-like receptor 4/nuclear factor kappa B,TLR4/NF-κ B)炎症信号转导通路和肾脏功能及组织形态学变化,探讨银杏叶提取物对大鼠SAP肾损伤的保护作用及相关机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料 健康雌性Sprague-Dewley(SD)大鼠90只,体质量200～240 g(购自泸州医学院动物科);银杏叶提取物(购自黑龙江省珍宝岛制药有限公司);牛磺胆酸钠(购自Sigma公司);肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-1,IL-6)的ELISA试剂盒(均购自博士德公司);兔抗大鼠T LR4多克隆抗体(购自博澳森公司);小鼠抗大鼠NF-κ B多克隆抗体(购自Santa Cruz公司)。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组和模型的复制 雌性SD大鼠90只,体质量200～240 g,随机分为假手术组(N组),重症急性胰腺炎模型组(P组),银杏叶提取物治疗组(S组),每组 30只。P组和 S组采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射方法复制大鼠重症急性胰腺炎模型,N组开腹后翻动肠壁即关腹。术后禁食,清醒后自由进水。S组大鼠在术后10 min给予银杏叶提取物(6.25 mg/kg)尾静脉注射;P组大鼠采用同样方法给予等量的生理盐水。于12、24、48 h时间点每组分别处死10只,光镜下P组和S组各时间点均选择6只造模成功的大鼠进入检测,以光镜下胰腺组织坏死、出血为造模成功。……