叶下珠复方对H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用研究

李思明 裴晶 李伟 徐福平

叶下珠复方由叶下珠、绿茶和三七叶组成，对于肝癌具有明显的防治作用，具有解毒活血、疏肝健脾的功效。叶下珠是大戟科植物（Phyllanthus urinaria Linn）的全草，具有清热利尿，消积解毒的功效，具有抗乙型肝炎病毒，抗肿瘤作用，抗HSV病毒等广泛药理活性[1-2]，三七为五加科植物三七（Panax notoginseng F.H.Chen）的根，其主要药理活性成分为人参皂苷和三七皂苷R1，R2等，具有多靶点抗肿瘤作用，可通过诱导细胞凋亡和分化等途径发挥抗肿瘤作用[3-4]。绿茶中具有茶多酚、儿茶素和咖啡碱等成分，通过阻断细胞增殖、阻断细胞周期和诱导细胞凋亡等途径抑制肿瘤生长增殖[5]。为考察叶下珠复方对动物移植性肝癌的抑制作用，本文以肝癌细胞H22荷瘤小鼠为模型，探讨不同剂量叶下珠复方对荷瘤小鼠肝癌细胞的影响。

1 材料

1.1 仪器与试剂

SW-CJ-IF超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司；十万分之一电子天平（Mettler Toledo AB135-S型）；Milli-Q型超纯水制备仪（美国Millipore公司）。

1.2 实验药物

叶下珠复方颗粒，由广州中医药大学实验室提供；注射用环磷酰胺(CTX)，批号09010321，江苏恒瑞医药股份有限公司。

1.3 实验动物

KM小鼠，SPF级，64只，雌性，18～22g，广东省医学实验动物中心，动物质量合格证：SCXK(粤)2008-0002。

1.4 瘤株

小鼠肝癌H22细胞株，由广东省中医院中心实验室提供。

2 方法与结果

2.1 小鼠H22肝癌细胞混悬液制备

选取已接种肝癌H22腹水瘤12d，肿瘤生长良好的荷瘤小鼠，颈椎脱臼处死，超净工作台上腹部用碘酒局部皮肤消毒，在无菌条件下取出腹水，置于已消毒烧杯中，加无菌生理盐水稀释成1∶3的瘤细胞悬液，置冰浴低温保持。……