血透对肾衰患者红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影响

苑记清

（天津医科大学总医院代谢病科，天津300052）

钠泵控制细胞许多重要功能，血管平滑肌细胞膜钠泵受抑制后，细胞内钙离子浓度增加，血管平滑肌收缩力增强，血压增高。有报道证实肾功能不全时Na+-K+-ATP酶活性下降，低蛋白饮食可恢复部分钠泵活性。有关血透对钠泵活性影响的报道限于一次血透前后钠泵活性的变化，为此笔者检测了血透、非血透肾功能不全患者红细胞膜钠泵活性，了解血透对钠泵活性的影响及意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 慢性肾功能不全患者共52例，其中慢性肾小球肾炎44例，梗阻性肾病、糖尿病肾病各2例，慢性肾盂肾炎、尿酸性肾病、多囊性肾病、狼疮性肾病各1例。按是否行血液透析治疗分2组，非血透组29例（男21例），平均年龄（40.8±15.2）岁，血肌酐（906.93±284.35）μmol/L；血透组 23例（男 15例），平均年龄(39.4±7.7)岁，血肌酐（432.45±197.36）μmol/L，血透时间（8.3±2.9）月；对照组为健康查体者 26例（男14例），平均年龄(42.7±18.6)岁。

1.2 方法

1.2.1 红细胞膜蛋白的制备 清晨空腹静脉取血6 mL，置于含 625U肝素的抗凝管中，摇匀，以2500r/min离心10min，分离血浆，用滴管吸出血细胞上的白细胞层。剩下的红细胞用生理盐水在同样的条件下洗涤3次。将洗净的红细胞置于8mL10mmol/L Tris-HCl缓冲液（pH:7.4）中溶血，放置 0.5 h后于16000 r/min下离心20 min，可见管底乳白色红细胞膜沉淀，弃去上清的血红蛋白液和管底的硬结，再用同样的缓冲液如此反复洗3次，可得乳白色红细胞膜。将膜悬浮于10 mmol/L Tris-HCl缓冲液中（pH:7.4），使其浓度在1 mg/mL左右。

1.2.2 Na+-K+-ATP酶活性的测定用孔雀绿定磷法测定酶活力，反应自加入ATP开始，于37℃保温10 min后加入定磷显色液1 mL终止酶反应。……