高效液相色谱法测定愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏含量

朱卫国，李 明

(宜昌人福药业有限责任公司，湖北 宜昌 443005)

小儿复方福尔可定糖浆是一种治疗小儿咳嗽的药物，其主药为愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏。作者在此对HPLC法测定条件进行了探讨，建立了同时测定愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏含量的方法，为小儿复方福尔可定糖浆的质量控制提供了依据。

1 实验

1.1 试药及仪器

小儿复方福尔可定糖浆(规格60 mL，批号为080423)。

乙腈、甲醇均为色谱纯，磷酸、三乙胺和庚烷磺酸钠均为分析纯；水为重蒸水；愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏对照品，中国药品生物制品检定所。

Agilent 1200型高效液相色谱仪。

1.2 方法

1.2.1 色谱条件与系统适用性条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。色谱柱：C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相：0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(每1000 mL加庚烷磺酸钠4.0 g、三乙胺1.0 mL，用磷酸调pH值至2.5)-乙腈-甲醇(50∶20∶30)，流速1 mL·min-1，检测波长：愈创木酚甘油醚为224 nm，福尔可定和马来酸氯苯那敏为214 nm。理论板数按愈创木酚甘油醚峰计算应不低于2000，各峰之间的分离度应符合要求。色谱图见图1。

1.福尔可定 2.愈创木酚甘油醚 3.马来酸氯苯那敏

1.2.2 含量测定

精密量取供试品(批号080423)5 mL，置25 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。再精密量取供试品溶液5 mL，置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取愈创木酚甘油醚对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，得小儿复方福尔可定糖浆中愈创木酚甘油醚含量。

同法测定小儿复方福尔可定糖浆中福尔可定和马来酸氯苯那敏的含量。

2 结果与讨论

2.1 辅料干扰实验

按制剂处方配制空白对照样品，制成空白对照品溶液，按色谱条件，取空白对照品溶液20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，辅料不干扰本品主成分的含量测定。

2.2 标准曲线的绘制

分别精密称取适量愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏对照品，用流动相配制成系列浓度的溶液。精密量取20 μL，注入色谱仪中，记录色谱图，以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归。结果表明：愈创木酚甘油醚在16.04～80.20 μg·mL-1、福尔可定在7.96～39.80 μg·mL-1、马来酸氯苯那敏在8.16～40.80 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好，回归方程(n=5)分别为：y=40.89c+33.0(R=0.9999)、y=70.22c+4.9(R=0.9999)和y=30.88c+10.9(R=0.9999)。

2.3 系统适用性

精密量取供试品适量(批号080423)，制成供试品溶液，精密量取20 μL注入色谱仪，重复进样5次，记录峰面积。结果表明，愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏的RSD分别为0.09%、0.60%、1.00%。

2.4 稳定性

精密量取供试品适量(批号080423)，制成供试品溶液，分别于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h精密量取20 μL注入色谱仪，记录峰面积。结果表明，供试品溶液在8 h内稳定。

2.5 重复性

取供试品(批号080423)6份，分别测定愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏的含量。结果表明，愈创木酚甘油醚含量为100.3%，RSD为0.55%；福尔可定含量为105.9%，RSD为0.18%；马来酸氯苯那敏含量为100.6%，RSD为0.33%。

2.6 回收率

分别精密称取愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏对照品适量，按处方比例加辅料，用水制成高、中、低(120%、100%、80%)3种含量溶液各3份。精密量取20 μL，按色谱条件测定。结果表明，回收率(n=9)分别为：愈创木酚甘油醚99.2%、福尔可定99.0%、马来酸氯苯那敏99.5%。

2.7 样品测定

精密量取供试品适量，制成供试品溶液；另分别精密称取愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏对照品适量，同法制成对照品溶液。分别精密量取上述溶液各20 μL，按色谱条件测定。结果表明，含量分别为：愈创木酚甘油醚99.0%、99.0%、98.7%，福尔可定99.1%、99.5%、99.4%，马来酸氯苯那敏98.7%、98.4%、99.2%。

2.8 讨论

2.8.1 检测波长的确定

分别取适量福尔可定、马来酸氯苯那敏和愈创木酚甘油醚对照品，加流动相溶解并稀释制成20 μg·mL-1的溶液。根据紫外扫描图谱可知，福尔可定在214 nm波长处有最大吸收，马来酸氯苯那敏在262 nm处有最大吸收，愈创木酚甘油醚在224 nm处有最大吸收。由于样品组分中福尔可定和马来酸氯苯那敏浓度为0.1 mg·mL-1，而愈创木酚甘油醚浓度为4 mg·mL-1，组分之间浓度相差很大，不宜同时测定3种组分的含量。福尔可定和马来酸氯苯那敏浓度相当，且浓度均较低，可以考虑同时测定两者的含量。福尔可定在214 nm波长处有最大吸收；马来酸氯苯那敏在200～250 nm范围内无最大吸收，但在214 nm波长处有较大吸收。故选择214 nm作为福尔可定和马来酸氯苯那敏含量测定的检测波长。愈创木酚甘油醚在224 nm处有最大吸收，故选择224 nm作为愈创木酚甘油醚含量测定的检测波长。

2.8.2 流动相的选择[1，2]

参照复方福尔可定糖浆国家药品标准WS1-(X-128)-2003Z，首先选用0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(每1000 mL加4.0 g庚烷磺酸钠、1.0 mL三乙胺，磷酸调pH值为3.0)-乙腈=70∶30为流动相，结果分离效果并不理想。后经逐步优化，选用0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(每1000 mL加4.0 g庚烷磺酸钠、1.0 mL三乙胺，磷酸调pH值为2.5)-甲醇-乙腈=50∶30∶20为流动相，结果3组分出峰时间合适，各组分峰之间的分离度符合要求。

3 结论

采用HPLC法同时测定愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏的含量。愈创木酚甘油醚在16.04～80.20 μg·mL-1、福尔可定在7.96～39.80 μg·mL-1、马来酸氯苯那敏在8.16～40.80 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好，R=0.9999，平均回收率分别为99.2%、99.0%和99.5%(n=9)。该法具有简单、快速、灵敏的特点，可同时测定愈创木酚甘油醚、福尔可定和马来酸氯苯那敏的含量。

[1] WS1-(X-128)-2003Z，复方福尔可定糖浆[S].

[2] 杨文远，吴晓红.用HPLC法同时测定可立停中的愈创木酚甘油醚、马来酸氯苯那敏和盐酸甲基麻黄碱[J].宁夏大学学报(自然科学版)，2002，23(4)：352-353，387.