西罗莫司胶囊微生物限度检查方法的建立

郑小玲，李 珏，张联珍，王知坚

(1.浙江省食品药品检验所，浙江 杭州 310004; 2.浙江省立同德医院检验科，浙江 杭州 310012)

西罗莫司是一种具有抗真菌活性而无抗细菌活性的大环内酯类化合物[1－2]。它在临床的主要作为免疫抑制剂用于防治肾移植排斥反应[3]。由于西罗莫司对真菌极为敏感，采用药典中所推荐的多种常规微生物限度检查方法对其进行微生物限度检查存在一定困难，在5种标准验证菌株中，白色念珠菌和黑曲霉的回收率无法达到要求。笔者建立了去除西罗莫司胶囊抑制真菌作用的方法，从而为其微生物限度检查方法的建立提供了依据。

1 仪器与材料

HTY－2000B型集菌仪(杭州高得医疗器械有限公司);一次性薄膜过滤器(规格 FC502，孔径0.45 μm，材质混合纤维素，批号为201000208，杭州高得泰林医疗器械有限公司);GWP－9160型隔水式恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司);SHP－250型生化培养箱(上海精宏实验设备有限公司)。西罗莫司胶囊(某制药企业，规格1 mg)。营养琼脂培养基(批号为100406)、玫瑰红钠琼脂培养基(批号为1001122)、胆盐乳糖培养基(批号为100301)均为北京三药科技开发有限公司生产，适用性试验均符合2010年版《中国药典(二部)》规定[4]。pH为7.0的无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液(批号为091102，杭州华锦药业有限公司)。枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis[CMCC(B)63501]、金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus[CMCC(B)26003]、大肠埃希菌 Escherichia coli[CMCC(F)44102]和白色念珠菌 Candida albicans[CMCC(F)98001]均由中国医学细菌保藏中心提供;黑曲霉 Aspergillus niger[CMCC(F)98003]由中国药品生物制品检定所提供。吐温－80(使用浓度为0.1%)[5]。

2 方法[4]与结果

2.1 菌液制备

接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉的新鲜培养物至对应培养基中，分别按规定时间和温度培养。……