雏鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和荚膜PCR分型

孙翠平，王金良，李书光，赵 蕾，贾 娟，莫 玲，沈志强,*

(1.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州256600；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州256600)

2010年7月河南某肉鸭场10日龄肉鸭发生急性、高死亡率疾病，病鸭表现精神沉郁、羽毛松乱、摇头、急性死亡等症状。经实验室诊断疑似鸭肝炎病毒和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)的混合感染，其中，鸭肝炎病毒感染已经被鉴定。

Pm是引起鸭霍乱的病原体，各种年龄的鸭均可以感染，常呈现败血经过，缺乏神经症状。青年鸭、成年鸭比雏鸭更易感，尤其是3周龄以内的雏鸭很少发生。鸭肝炎症状主要发生于4日龄～20日龄雏鸭，而成年鸭有抵抗力。

由于Pm荚膜血清型决定病原菌的免疫原性，各血清型之间交叉免疫保护性较低，因此，对致病菌进行荚膜分型尤为重要。按照1984年Carter提出的血清学标准分型方法，以及间接血凝试验数据，将该菌分为A、B、D、E和F 5个荚膜血清型[1]。Townsend等建立了Pm多重PCR分型方法，并得到国内研究者的证实[2-5]。因此，本实验采用该Pm多重PCR分型方法对鉴定为阳性的Pm进行荚膜血清分型。

本研究通过对病死鸭进行剖检、肝脏涂片染色、病原分离、生化鉴定、动物试验及PCR检测和同源性分析，确定从感染鸭肝炎病毒的10日龄鸭肝脏分离的细菌为A型Pm，与Pm杀禽亚种和多杀亚种亲缘关系最近，可能为Pm多杀亚种。

1 材料和方法

1.1 主要试验材料 Pm C48-1购自中国兽医药品监察所，由本公司菌毒种室保存；SPF鸡购自山东省农业科学院家禽研究所；雏鸭购自山东邹平久久鸭业有限公司；……