PTEN、PCNA、CerbB-2在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

叶木石,苏 劲

(广东医学院附属医院泌尿外科,广东湛江,524023)

目前认为,膀胱肿瘤的发生发展基于多因素的结构,其中抑癌基因(PTEN)起重要的作用。PTEN是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其编码的蛋白质是一种磷酸酶,通过PI3K/Akt途径影响细胞的生长、增殖、浸润转移等生物学行为。目前国内尚较少见对于膀胱尿路上皮癌中PTEN的研究报道,为探讨PTEN在膀胱尿路上皮癌中的作用,本实验对膀胱尿路上皮癌和膀胱良性病变组织PTEN基因的表达进行检测,探讨其与膀胱尿路上皮癌发生发展的关系及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料收集

2007年6月～2009年4月本院收存膀胱尿路上皮癌病理石蜡块45例,其中男36例,女9例,年龄42～76岁,平均年龄61.4岁。病理分级按WHO分级标准,Ⅰ级14例,Ⅱ级22例,Ⅲ级9例。临床分期按UICC-TNM标准,T112例,T224例,T39例。经开放手术取30例正常膀胱黏膜组织作为对照组。

1.2 方法

采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测3项指标的蛋白表达。免疫组化染色过程:石蜡切片、烘烤、脱蜡、过氧化氢灭活内源性过氧化物酶,微波修复抗原,血清封闭,PTEN羊多克隆蛋白抗体[细胞增殖核抗原(PCNA)和原癌基因(CerbB-2)蛋白抗体]4℃过夜孵育,PBS冲洗,链霉素白素标记兔抗羊血清置于室温下30 min,冲洗,辣根过氧化物酶标记抗体置于室温下30 min,冲洗后DAB显色,苏木素染色,封片。并以原已知阳性尿路上皮癌作阳性对照,用PBS液取代第一抗体标记作阴性对照,以便较为确切而客观地反映检测结果,显微镜下观察。

1.3 结果判定标准

每张切片随机选取10个视野,高倍镜下计数500～1 000个细胞。……