量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立*

曾晶晶,何梦博,赵芝娜,周世冠,王桂珍

量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立*

曾晶晶,何梦博,赵芝娜,周世冠,王桂珍

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μ g/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于M p感染的早期诊断。

肺炎支原体;量子点标记技术;抗原检测

近年来,量子点凭借其自身独特的光谱特征和光化学稳定性越来越受到人们的重视。量子点(quantum dots,QDs)是一种半导体纳米晶体,与传统荧光染料相比,具有激发光谱宽、发射光谱窄、发光效率高,发光颜色可调,并且具有较高的荧光强度和光稳定性,能够承受多次的激发和光发射等一系列优点[1-2],在实验室诊断中有着广泛的应用前景。

肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)不仅引起急性呼吸道疾病,还引起其他多系统、多器官的肺外并发症[3]。由于Mp无细胞壁,故其引起感染的治疗与其它细菌和病毒感染在治疗方法上有所不同。对Mp的实验室诊断,支原体分离培养虽然是金标准,但其分离率低、时间长,成本高不适于临床应用[4]、主要是通过血清学检测和分子生物学[5]等方法,而这些方法存在着各自不同的优缺点,因此,到目前为止,国内外对Mp的实验室诊断没有统一的标准。……