液质联用技术检测硫酸多黏菌素B中各组分

刘孟娟，周陈西，胡方剑

(1.浙江省肿瘤医院药剂科，浙江 杭州 310022; 2.杭州中美华东制药有限公司，浙江 杭州 310022)

硫酸多黏菌素B为快速杀菌剂，美国传染病协会(IDSA)重点指出的“超级疯狂菌”铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌，对其的耐药率不高[1]。其静脉滴注可治疗由多药耐药革兰阴性菌引起的严重感染，但因其有较严重的肾脏毒性和神经系统毒性而一度被弃用。近年来，多药耐药革兰阴性菌感染广泛流行，多黏菌素作为治疗的最后选择再次被应用于临床。硫酸多黏菌素B系由多黏芽胞杆菌产生的一组多肽类抗生素，由至少4种结构相近的成分组成，其中多黏菌素B1和B2是主要成分。第6版《欧洲药典》(EP 6.0)[2]建立了液相色谱法鉴定硫酸多黏菌素B各组分，经检索，国内尚无相关文献报道。笔者以高效液相色谱法以及液质联用技术检测硫酸多黏菌素B的各个组分，报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1100型高效液相色谱仪(美国Agilent);ZMD型质谱检测器;(Waters公司)Masslynx工作站。多黏菌素B(杭州中美华东制药有限公司，批号为100502);多黏菌素B对照品(欧洲药典标准品);甲醇、乙腈及其他试剂均为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱、质谱条件

2.1.1 高效液相色谱条件(EP 6.0)

色谱柱:末端封尾 C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);柱温:30℃;流动相:硫酸钠缓冲液(取4.46 g无水硫酸钠加入900 mL水中，用磷酸调节到pH=2.3，再用水定容到1 000 mL)－乙腈(80∶20);检测波长:215 nm;流速:1.0 mL/min;进样质量浓度:0.5 g/L;进样体积:20 μL。

2.1.2 液质联用色谱、质谱条件

色谱柱:Waters Symmetry C18柱(300 Å，150 mm ×2.1 mm，4 μm);流动相:乙腈－0.01 mol/L三氟乙酸溶液(80∶20);稀释液:乙腈－水(20∶80);柱温:30℃;质谱检测器中流速:0.25 mL/min;进样质量浓度:0.5 g/L;进样体积:20 μL。……