不同毒力疟原虫感染早期根治性治疗对再感染细胞免疫应答的影响

刘英杰,潘艳艳,李 莹,冯 辉,刘 军,曹雅明

2.中国医科大学免疫学教研室,沈阳 110001

疟疾流行主要由恶性疟原虫和间日疟原虫感染所致,但两个虫种的毒力存在明显差异,其中前者毒力较强,是导致重症疟疾发生的主要虫种。疟疾再感染的发生在流行区普遍存在,但恶性疟再感染的发生风险显著高于间日疟[1],表明原虫毒力差异与再感染的免疫保护存在密切相关性。细胞免疫应答是抵御胞内寄生病原体再感染的主要因素[2],然而毒力不同的疟原虫感染早期根治性治疗后,宿主在再感染过程中细胞免疫应答是否存在差异,目前尚未见明确报道。

致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii17XL,Py17XL)和非致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii17XNL,Py17XNL)分别与恶性疟原虫和间日疟原虫具有相似的生物学特性[3]。为此,我们对Py17XL和Py17XNL感染早期DBA/2小鼠进行根治性治疗,然后用同种疟原虫进行再感染,通过对再感染前后细胞免疫应答强度的检测,探讨了毒力不同疟原虫感染早期的根治性治疗对再感染细胞免疫应答的影响。

1 材料与方法

1.1 小鼠、疟原虫和实验感染 雌性,6～8 w龄DBA/2小鼠,分别经腹腔接种1×106Py17XL和Py17XNL寄生的红细胞。尾静脉采血,吉姆萨薄血膜染色法计数红细胞感染率。

1.2 药物治疗和小鼠再感染 初次感染后3 d,经口给药(氯喹90 mg/kg,青蒿琥脂片60 mg/kg),每天一次,连续3 d。待初次感染后90 d,小鼠用同种疟原虫再次攻击感染。

1.3 脾细胞培养 无菌取出再感染前(0 d)和再感染后第1、3、5 d小鼠脾脏,常规制备脾细胞悬液,调脾细胞终浓度为1×107/mL,于24孔培养板上加入细胞悬液,500 μ L/孔,一式 3 组 ,培养 48 h,收集上清,-80℃保存,待细胞因子检测。……