山羊SREBP-1基因的超表达对脂肪酸代谢相关基因表达的影响

2012-02-09 00:55:40许会芬罗军李芳余康石恒波李君林先滋朱江江
生物工程学报 2012年11期

许会芬,罗军,李芳,余康,石恒波,李君,林先滋,朱江江

西北农林科技大学动物科技学院 陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西 杨凌 712100

固醇调节元件结合蛋白 (Sterol regulatory element binding protein,SREBPs) 是体内重要的核转录因子,属于 bHLH-Zip (Basic helixloop-helix leucine zipper) 核转录因子超家族的一员,与体内胆固醇及脂肪生成基因的调节密切相关[1-2]。研究发现,SREBPs可以直接激活胆固醇、脂肪酸、甘油三酯及磷脂生物合成及摄取过程中 30多个基因及还原型辅酶Ⅱ (NADPH) 的表达[2-4]。乳腺作为哺乳动物的特有器官,是机体脂质合成的3个主要部位 (脂肪、肝脏及乳腺)之一[5]。与肝脏、脂肪不同的是,乳腺具有较强的泌乳功能,可以使外源基因在乳腺中表达后随乳汁排出体外[6],是研究基因功能的良好材料。研究表明,SREBP-1基因对哺乳动物乳腺脂肪酸代谢过程发挥重要调控作用。在小鼠泌乳期内,SREBP-1基因的表达量是干奶期的3~4倍,其靶基因的表达量也有不同程度的上调,在泌乳高峰期达到最高[7]。并且随着泌乳高峰期的到来,乳中短中链脂肪酸 (C6∶0−C14∶0) 的比例也随之增大。山羊奶中短中链脂肪酸含量高,具有较高的营养价值,而关于羊奶脂肪酸代谢相关基因功能的研究较少,因此SREBP-1基因的超表达研究有助于揭示该基因的功能。

本研究通过构建 SREBP-1基因的重组腺病毒超表达载体,转染HEK 293细胞包装扩增出高滴度的腺病毒,并感染乳腺上皮细胞,研究该基因超表达后对脂肪酸代谢相关基因的影响,为SREBP-1基因的功能研究及奶山羊脂肪酸代谢调控基因网络构建等提供实验依据。……

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