改良Genome shuffling技术选育埃博霉素B高产菌株

龚国利，陈 松，李 慧，曾 桥

（1.陕西科技大学 生命科学与工程学院，陕西 西安 710021；2.陕西科技大学 资源与环境学院，陕西 西安 710021）

埃坡霉素（epothilone，Epo）是最初从纤维堆囊菌Soce 90的发酵液中分离出来的细胞毒化合物，与紫杉醇的生物活性相似，也能稳定微管组装过程而抑制细胞分裂，但两者在化学结构和来源上完全不同。Epo不易受P-糖蛋白（P-glycoprotein）影响，因而抗肿瘤活性较强、抗肿瘤谱广。且Epo水溶性较好，不良反应少，化学结构简单，易修饰[1]。Epo共有8种衍生物，目前关于Epo A和Epo B的研究较多。纤维堆囊菌（Sorangium cellulosum）形态多变，次级代谢产物种类繁多，产量低且不稳定。

基因组重组（Genome shuffling）技术是近几年新发展起来的一种微生物育种方法，该技术具有不需要事先知道微生物的遗传背景，也可以对其进行遗传育种的突出优点，使之成为了一种极其高效的微生物育种方法。Genome shuffling技术是指将具有不同正突变的不同菌株的全基因组进行随机重组，快速选育出具有较大改进的杂交菌株的方法。ZHANGYX等[2]已成功地通过基因组改组的方法提高弗氏链霉菌的泰乐菌素的产量；RANJAN PATNAKIK R等[3]通过基因组改组技术使得乳杆菌的耐酸性能有了较大提高；DAINH等[4]通过三轮基因组重排将Sphingobiumchorophenoclicum对剧毒杀虫剂五氯苯酚的耐受浓度提高了10倍以上，并可将培养基中所含的3mmol/L五氯苯酚完全降解。

本研究对Genome shuffling育种方法进行了改良，其主要特点是在递归原生质体融合的过程中增加了原生质体的诱变过程。并且用改良后Genome shuffling育种方法选育埃博霉素B高产菌株。……