质谱技术在氨基酸分析方法中的应用

熊 霞， 杨焕胜， 印遇龙

（中国科学院 亚热带农业生态研究所，湖南 长沙，410125）

氨基酸不仅是蛋白质的组成单位，也是参与调节基因表达和蛋白质磷酸化级联反应的细胞信号分子。此外，氨基酸还是肠道主要能量来源和合成神经递质、多胺和NO的前体物质[1-3]。氨基酸作为代谢过程的重要靶标，它们的定量分析对于疾病诊断以及阐明不同营养状况对机体生理机能的影响非常重要。氨基酸分析方法就是测定含游离氨基酸，多肽或蛋白质样品中氨基酸含量的方法。目前，氨基酸分析在氨基酸代谢系统疾病的临床诊断、生物医药研究、生物工程、食品科学等领域中有着广泛而重要的应用[4]。

目前存在的氨基酸分析方法有柱前衍生-离子交换色谱[5-8]、气相色谱[9-12]、液相色谱[13-14]和毛细管电泳[15-16]等。在过去几十年中，氨基酸分析主要是通过柱前衍生-离子交换色谱和邻苯二甲醛（OPA）与氯甲酸芴甲酯（FMOC）柱前衍生-液相色谱分离，光度检测法检测完成的。柱前衍生-离子交换色谱法重复性高，但分析时间长，耗费高。柱前衍生液相色谱法灵敏快速，但对分析物的特异性不强。而且这两种方法都不能区分14N和15N标记氨基酸，不能进行同位素标记定量。随着现代氨基酸分析技术的发展，质谱作为高选择性和高灵敏度的检测工具，在氨基酸分析中发挥着重要作用。作者就近30年来国内外液相色谱-质谱联用（LC-MS）、气相色谱质谱联用（GC-MS）和毛细管电泳-质谱联用（GE-MS）技术在氨基酸分析中的应用进行了综述并对目前存在的主要氨基酸分析技术进行了比较。……