丹参注射液对细胞基底样乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响

周瑞芳，刘鹏熙，刘晓雁

(广州中医药大学附属二院，广东省中医院，广东 广州 510405)

细胞基底样乳腺癌(basal-like)生物学特性具有侵袭性，容易发生转移，预后较差,不适合使用内分泌治疗,也无其他有效治疗手段，是目前治疗的难点之一[1]。因此，中医药干预在该亚型乳腺癌的综合治疗中就显得尤为重要。本研究应用中药丹参注射液进行研究，观察其对basal-like型的人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长的影响，期望能为basal-like型乳腺癌的治疗提供新的契入点。

1 材料与方法

1.1 材料 basal-like型乳腺癌细胞株MDA-MB-231(购自中国科学院上海生科院细胞资源中心)；小牛血清，RPMI1640培养基(美国Gibco公司)；0.25%胰蛋白酶，磷酸盐缓冲液(PBS，广州展晨生物科技有限公司)；青霉素、链霉素(广州天心制药厂)；噻唑蓝(MTT，美国Sigma公司)；二甲基亚砜(DMSO，美国Sigma公司)；丹参注射液(批号:061123)江西桔都药业有限公司。

1.2 细胞培养 人乳腺癌MDA-MB-231细胞采用开放式单层贴壁培养，培养液RPMI1640(10%小牛血清，青霉素100 U/mL，链霉素100 μg/mL)，生长条件：37 ℃,5%CO2，相对饱和湿度。每天观察生长情况，贴壁2～5 d传代1次。实验时取对数生长期细胞。

1.3 实验分组 细胞对照组:不加任何处理因素，各处理组各浓度水平的共同对照。5个剂量丹参注射液组：2×10-1g/mL、2×10-2g/mL、2×10-3g/mL、2×10-4g/mL、2×10-5g/mL的丹参注射液。

1.4 观察指标

1.4.1 细胞存活率观察 MTT法测细胞增殖，收集对数生长期MDA-MB-231细胞，调整细胞悬液浓度为2×104/mL 接种于96孔板，培养箱内培养24 h,分别加入不同浓度梯度的丹参注射液继续培养，之后每隔24 h，每孔加入MTT(5 mg/mL)溶液20 μL,继续孵育4 h 终止培养，弃去孔内培养上清液，每孔加入DMSO 200 μL，使结晶物充分溶解。MTT比色法测定各孔光密度值，记录结果。……