壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

王翠翠，郭宇星,*，潘道东,2

(1.南京师范大学金陵女子学院，江苏 南京 210097；2.宁波大学海洋学院，浙江 宁波 315211)

壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

王翠翠1，郭宇星1,*，潘道东1,2

(1.南京师范大学金陵女子学院，江苏 南京 210097；2.宁波大学海洋学院，浙江 宁波 315211)

以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上，以固定化酶活力为主要指标，研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化，确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL，此时固定化酶活力为28.67U。

瑞士乳杆菌蛋白酶；固定化；酶活力

近年来研究发现采用某些瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)菌株制作的发酵乳有较强的降高血压功能，主要是因为瑞士乳杆菌的蛋白酶可分解乳蛋白产生多肽，这些多肽对血管紧张素转移酶(angiotensin I-converting enzyme，ACE)[1]具有抑制作用，从而可降低人体血压。血管紧张素转化酶(angiotensin-I converting enzyme，EC3.4.15.1)抑制肽是一类具有抑制ACE活性的肽类物质，这些多肽具有降血压的功能[2]。在瑞士乳杆菌蛋白酶研究方面，Guo Yuxing[3-4]、Yamamoto[5]、Fang[6]、Coolbear[7]等对细胞壁蛋白酶的纯化、反应条件、特异性、生产利用及稳定性等进行了研究。郭宇星等[8]从瑞士乳杆菌ATCC15019发酵乳及其胞内粗提物水解脱脂乳的水解液中分离到具有较强ACE抑制活性和降高血压功能的活性肽Ile-Pro-Pro (IPP)和Val-Pro-Pro (VPP)。……