耐有机溶剂脂肪酶产生菌的筛选及其粗酶酶学性质

李俊峰，李红芳，段效辉，门晋名，宿 烽

(1. 青岛科技大学化工学院，山东 青岛 266042；2. 烟台出入境检验检疫局，山东 烟台 264000)

耐有机溶剂脂肪酶产生菌的筛选及其粗酶酶学性质

李俊峰1，李红芳1，段效辉2，门晋名1，宿 烽1

(1. 青岛科技大学化工学院，山东 青岛 266042；2. 烟台出入境检验检疫局，山东 烟台 264000)

以体积分数2%苯为筛选压力，利用罗丹明B平板显色法和摇瓶发酵法，从采集的花生地土壤样品中分离筛选得到1株中度耐热、耐碱脂肪酶产生菌，编号为H2。通过形态观察、生理生化特性实验及其16S rDNA基因序列对菌种进行鉴定。结果表明，H2菌株与短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的亲缘关系最紧密。通过研究得到该菌株的摇瓶发酵条件：产酶培养基为：蛋白胨3%、酵母膏1%、NaCl 0.5%、橄榄油1%，pH7.0，摇瓶发酵温度为28℃，摇床转速为180r/min，发酵周期为48～60h。所产脂肪酶在40℃、pH9.0时酶活性最高，对pH值和温度的适应范围较宽，pH6.0～10.0比较稳定，35～50℃具有较高酶活性。

耐有机溶剂；短小芽孢杆菌；脂肪酶；筛选

脂肪酶(EC3.1.1.3)是一类特殊的酰基水解酶，除能够催化甘油酯类化合物的水解和合成外，还能在油水界面上催化酯的水解和合成、酯交换、生物表面活性剂的合成、多肽合成、高聚合物合成和手性药物合成等有机合成反应，它可将甘油三酯分解成脂肪酸和甘油或进行其逆反应[1-3]，在工业生产中有着广泛应用。目前，脂肪酶在工业生产中被广泛应用于食品与营养、轻工业、皮革、香料、化妆品、洗涤剂、有机合成、药物合成等领域[4-5]。脂肪酶催化的许多反应是在非水相中进行的，由于许多微生物和其分泌的酶在有机溶剂中会被破坏和失活，限制了生物转化在化学工业上的应用[6]，因此从自然界中寻找耐有机溶剂、高活力的脂肪酶菌株，可为脂肪酶开发提供基础。……