FQ-PCR技术在小儿结核性脑膜炎诊断中的应用

刘彦轩，贾安奎，郭盛菊，尚好珍

(1新乡医学院第一附属医院，河南新乡453100;2河南省结核病医院)

结核性脑膜炎(简称结脑)是小儿时期最常见和最严重的肺外结核病之一，病死率高达30% ～50%，幸存者中20% ～50%遗留有永久性神经系统后遗症(如偏瘫、失语、失明等)，早期诊断是决定患儿预后的关键因素［1］。目前临床诊断结脑多依靠实验室检查，但常规实验方法敏感性低、耗时长。陈效友等［2］研究显示，以Taq酶标记的荧光定量PCR(FQ-PCR)检测痰和血标本中结核菌(TB)灵敏度高达10fg DNA和1～5个菌体/mL，灵敏度比普通PCR高10～100倍。2009年3月～2011年2月，我们应用FQ-PCR技术对30例结脑患儿脑脊液中TBDNA进行了检测，并与抗酸杆菌涂片、TB培养、TBAb、腺苷酸脱氨酶(ADA)活性指标进行了比较，旨在为结脑早期诊断提供一个较适宜的实验室诊断方法。

1 资料与方法

1.1 临床资料 同期收治的结脑住院患儿30例(结脑组)，男、女各15例，年龄6个月～12岁(平均5.7 岁)，体质量指数(BMI)为(18.3 ±1.6)kg/m2。均符合胡亚美主编第2002版《实用儿科学》诊断标准，未进行脑脊液检查的结脑患儿［1］排除。另设我院收治的非TB感染性脑膜炎或脑炎患儿为对照组，男、女各15例，年龄5个月 ～12岁(平均5.5岁)，BMI为(19.1 ±1.7)kg/m2;均根据临床表现、脑脊液蛋白增加或葡萄糖量降低，一般抗生素治疗有效或脑脊液中查到特异性病毒抗体IgM，或培养出一般细菌等诊断［3］，其中病毒性脑膜炎18例、化脓性脑膜炎6例、隐球菌脑膜炎3例、脑膜瘤2例、流行性乙型脑炎1例。两组年龄、性别等一般资料具有可比性。

1.2 脑脊液中相关指标检测 ① TB-DNA:采用FQ-PCR法(中山大学达安基因公司产DA7600型扩增仪)。……