急性脑缺血大鼠鼻腔给予rhEPO治疗后脑组织中Ngb 和TNF－α的表达1）

柴秀琴，郭军红

脑血管病的治疗一直是人们关注的焦点。近年来研究表明EPO对缺血性脑损伤具有神经保护作用[1，2]，且外源性EPO可通过血脑屏障进入颅内[3]。在动物实验中，传统采用EPO腹腔给药的方法，其发挥作用的适宜剂量偏高，且产生多种副反应。鼻腔给药是一种新型的给药方法，它具有脑靶向性[4]。通过鼻腔靶向药物直接进入中枢神经系统的给药方法，可以使药物的全身毒性反应降低，组织特异性的药物浓度明显升高[5]。本实验对脑缺血大鼠小剂量rhEPO鼻腔给药，通过测量脑组织含水量，脑梗死体积，脑组织中肿瘤坏死因子α（TNF－α）和神经球蛋白（Ngb）的表达，证实rh EPO鼻腔给药方式的可行性，进一步探讨rhEPO对缺血性脑损伤的保护机制。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 54只健康雄性SD大鼠，体重250 g～300 g，由山西医科大学动物实验中心提供。将其随机分为对照组、模型组、rhEPO治疗组，每组18只。每组随机选取6只行脑组织含水量测定，6只行脑梗死体积测定，6只进行免疫组织化学法检测TNF－α与Ngb的表达。

1.2 实验方法

1.2.1 模型制作 采用Zea－Longa改良线栓法[6]制备大鼠永久性局灶性脑缺血（p MCAO）模型。通过Longa[6]的5级4分制评分法作为模型成功的判定标准。rh EPO治疗组在缺血1 h鼻腔给予小剂量rhEPO（48 U/40μL），模型组和对照组在缺血1 h鼻腔给予等量的生理盐水。缺血24 h后断头处死大鼠，取出完整脑组织。

1.2.2 鼻腔给药 按照van den Berg等[7]鼻腔给药的方法。rh EPO治疗组大鼠在脑缺血1 h后，将其固定于立体定位架，保持－70°角仰卧，用微量注射器取rhEPO（48 U/40μL），分别将药液缓慢滴入两侧鼻孔，不超过20 min，给药后保持体位30 min，以避免药物丢失。……