李海梅,马 莺,崔艳华,汪加琦,李启明,何胜华
(1.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,150090 哈尔滨;2.新希望乳业有限公司研究开发中心,610041 成都)
牦牛乳中主要过敏原的分离纯化
李海梅1,马 莺1,崔艳华1,汪加琦2,李启明2,何胜华1
(1.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,150090 哈尔滨;2.新希望乳业有限公司研究开发中心,610041 成都)
为研究牦牛乳蛋白质的过敏性,用化学方法分离牦牛乳中主要的过敏原蛋白质,采用快速蛋白纯化系统(FPLC)结合凝胶层析技术对分离出的蛋白质进行纯化.在牦牛脱脂乳中添加10%醋酸至酪蛋白的等电点pH4.6,使酪蛋白和乳清蛋白分离.根据酪蛋白在尿素溶液中的溶解度和对钙的敏感性不同,对酪蛋白进行粗分级,得到αs-酪蛋白和β-酪蛋白.应用离子交换色谱和葡聚凝胶sephadex G100进一步纯化粗分级得到的酪蛋白,得到αs-casein和β-酪蛋白.以柠檬酸钠为螯合剂、在低pH并有盐存在的条件下从酸乳清中分离出β-乳球蛋白,FPLC纯化后用RP-HPLC检测其纯度,得到αs-casein和β-酪蛋白纯度分别为87.13%和88.58%,β-乳球蛋白的纯度为80.00%.
牦牛乳;酪蛋白分离;β-乳球蛋白分离;快速蛋白纯化色谱
牛乳中主要的过敏原蛋白为αs-酪蛋白、β-酪蛋白和β-乳球蛋白[1].牦牛乳蛋白质组成与牛乳相似[2],哺乳动物又具有交叉免疫原性,因此,牦牛乳中的过敏原蛋白质可能与牛乳中的相似.为了更好地研究牦牛乳的过敏机制,对牦牛乳中主要过敏原蛋白质进行分离纯化是非常必要的.
目前能有效分离乳中αs-酪蛋白、β-酪蛋白的方法……