硫化氢对急性缺血所致心肌细胞凋亡的影响

张建新，丁艳艳，李兰芳，刘 芳，张勤增，解丽君，郝 娜

(河北省医学科学院，河北 石家庄 050021)

研究显示，急性心肌缺血和心肌梗死等心血管疾病有细胞凋亡现象存在［1］。细胞凋亡是按细胞的固有基因程序进行的一种生理现象，不同于一般病理情况下的细胞死亡，是机体为维护内环境的稳定，通过基因调控和酶促反应进行的细胞程序化死亡。近些年来研究发现，硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)在机体内发挥着广泛的生物学效应，本研究室前期实验表明，大鼠在急性心肌缺血过程中内源性H2S的含量明显下降，心肌组织CSE活性明显降低，线粒体功能受损，给予H2S可明显减轻心肌缺血损伤，改善心功能和线粒体功能，从而有效保护缺血的心肌［2－3］。但是其对缺血心肌细胞凋亡的影响尚未见报道。本实验观察了H2S供体—硫氢化钠(NaHS)对大鼠急性心肌缺血后心肌细胞凋亡率、caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响，旨在进一步探讨H2S对缺血受损心肌的作用及其可能机制。

1 材料与方法

1.1 药物和试剂 NaHS、溴化乙啶(ethidium bromide，EB)，美国Sigma公司。考马斯亮蓝试剂盒购自南京建成生物工程研究所。兔抗活化型caspase-3单抗，武汉博士德。鼠抗Bcl-2单抗、鼠抗Bax单抗、丙烯酰胺、N，N-亚甲双丙烯酰胺，美国Santa Cruz公司。免疫组化检测试剂盒、DAB试剂盒、辣根酶标记山羊抗兔购自北京中杉金桥生物技术公司。

1.2 仪器 电动匀浆器(Silentcrusher M，德国Heidolph公司)。电泳仪(DYY-Ⅲ7B型)。水浴式电转膜仪(DYY-Ⅲ40B型)。显微镜(Olympus BX40型)。低温高速离心机(德国Eppendorf)。流式细胞仪(Epics-XLⅡ型)。

1.3 实验动物 健康♂Sprague-Dawley(SD)大鼠，8～10周龄，体质量(270±20)g，由河北省实验动物中心提供。……