肇东苜蓿田海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析试验研究

陈效杰 薛 勇孙 睿邵 红 姜 成 朱德全

（1.黑龙江农业职业技术学院 黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯大学生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007）

啶嘧磺隆属磺酰脲类除草剂，主要抑制产生侧链氨基酸、亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的前驱物乙酰乳酸合成酶的反应。海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG为内吸性传导型除草剂，可被杂草茎叶和根部吸收，并传导至整株杂草发挥作用[1]。

1 试剂与仪器

甲醇：色谱纯甲醇（HPLC级试剂）；蒸馏水：新蒸二次蒸馏水；磷酸、磷酸二氢钾：分析纯；啶嘧磺隆标准品:≥98.8%；过滤器:滤膜孔径为0.45μm；微量进样器:10μL；色谱工作站：N2000色谱工作站（浙江大学智达信息有限公司）；超声波清洗器：超声波清洗器（杭州赛智科技有限公司）；高效液相色谱仪：LC-10Tvp等度高效液相色谱仪（杭州赛智科技有限公司）；海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG。

2 LC-10Tvp等度高效液相色谱仪操作条件

流动相：甲醇-水(pH值4.0，用磷酸二氢钾、磷酸调节)(体积比75：25)，流量：1.0mL/min，柱温：室温，检测波长：228nm，进样体积：20mL，保留时间：海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG 4.208min。

3 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析测定

3.1 高效液相色谱标样溶液的配制

称海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG0.07g(精确至0.0002g)，标样置于100mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约10min，取出降至室温用甲醇定容，摇匀，再用0.45μm滤膜过滤,滤液待测[2]。

3.2 高效液相色谱试样溶液的配制

称海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG0.02g(准确至0.0002g)试样置于50mL容量瓶中,加入适量甲醇溶解,容量瓶置于超声波浴槽中约10min，取出降至室温用甲醇定容，摇匀，再用0.45μm滤膜过滤,滤液待测。

3.3 高效液相色谱试样溶液的测定

LC-10Tvp等度高效液相色谱仪操作条件下，LC-10Tvp等度高效液相色谱仪待基线稳定后，连续注入数针标准溶液,计算各针相对响应值，直至相邻两针海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面积变化小于1.5%，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定[3]。

3.4 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG计算

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG残留高效液相色谱分析测定，将测得的两针试样溶液和试样溶液前后两针标准溶液中的海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面积分别进行平均。以质量分数表示的海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的含量(X)按下式计算:

X（%）=(A2×m1×P)/(A1×m2) 式中：

A1—标准溶液中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG峰面积的平均值；

A2—试样溶液中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG峰面积的平均值；

m1—海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG标样的质量（g）；

m2—海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG试样的质量（g）；

P—标准品中海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的质量分数（%）[4]。

4 结果与讨论

4.1 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG流动相的选择

4.1.1 流动相的选择原则

①由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。②三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。③粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变[5]。

4.1.2 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG流动相的选择

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG分析过程中，遵守流动相的选择原则能得到好的峰形且简便快捷，通过海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG多次配比试验，最后发现甲醇：水=70：30(V/V)的体积比为流动相，流速为1.0mL/min时,海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG分析时间短，出峰尖锐对称保留时间适合要求，样品中加入磷酸二氢钾、磷酸可使海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG有效成分及其杂质完全分开。

4.2 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG检测波长的选择

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的判定，往往并不通过外标法或内标法测定，而采用面积归一化法结合其它测定结果。

4.2.1 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品采用其它手段，确认主体是所需化学结构

4.2.2 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品很纯条件下，用顶空色谱法测定残留溶剂

4.2.3 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品中游离的水分，一般要求小于0.2%，在液相色谱中无法测定其含水量

4.2.4 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品中灼烧残渣或灰分，在液相中无法测定无机盐类

4.2.5 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品用离子色谱测定可能存在的一些小分子有机酸

4.2.6 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品用其它辅助手段，如熔点、折光率、元素分析等[6]

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG经全波长扫描，发现在228nm处海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG有较强吸收峰，最终选定228 nm作为检测波长。

4.3 海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG检测方法的线性相关性测定

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG在检测波长228nm处，移取海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG样品质量浓度0.750 g/L的标样溶液5、10、15、20、30mL稀释至50mL，然后分别进样。测得海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的线性方程为y=668.22x+3408.8，相关系数为r=0.9998。

5 结论

海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的试验分析方法，从试验分析结果来看有定量准确与重复性好及非常好的线性关系和非常高的准确度及精密度，海正绿坊25%啶嘧磺隆WDG的试验分析方法操作简便及快速，是肇东苜蓿进行质量检测理想的分析方法。

［1］http://www.yuanlin365.com/product/20621.shtml[OL].

［2］邵建果，杨俊柱.25%啶嘧磺隆水分散粒剂的反相高效液相色谱测定[J].安徽化工，2008，2:64-65.

［3］廖戎，吴军.除草剂啶嘧磺隆原药高效液相色谱分析[J].农药,2008,9:659-660.

［4］闫好民，张云枫.氟嘧磺隆高效液相色谱分析方法的研究[J].浙江化工，2012，7:33-34.

［5］http://bbs.antpedia.com/thread-21408-1-1.html[OL].

［6］http://www.360doc.com/content/11/0317/09/2867540_101863160.shtml[OL].