血浆EBV-DNA与VCA-IgA联合检测对鼻咽癌诊断的意义

范国宇 刘伟

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我国常见的恶性肿瘤，大多NPC患者就诊时已经出现颈部淋巴结转移甚至远处转移，尚缺乏有效的分子标志物［1］。大量资料显示EB病毒和鼻咽癌有密切关系［2］，鼻咽癌患者外周血中存在多种EB病毒的相关抗原、抗体，长期以来，检测EB病毒壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)是鼻咽癌诊断的主要辅助指标，但因其假阳性较高，为鼻咽癌的早期诊断带来一定困难［3］，近年来发现血浆EBV-DNA水平是一种可靠的监测指标［4］，血浆EBVDNA水平与体内肿瘤负荷呈正相关［5］。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2005年12月至2010年9月于我院确诊为鼻咽癌患者88例，所有患者初诊时均经病理学诊断为鳞癌，其中男57例，女31例，年龄24～68岁，中位年龄45岁。同期行健康体检者45例作为对照组，男30例，女15例，年龄36～70岁，中位年龄50岁，排除患有肿瘤性疾病。

1.2 临床分期 根据1992年全国鼻咽癌福州会议推荐的分期［6］。早期鼻咽癌患者38例，其中Ⅰ期21例、Ⅱ期17例，晚期鼻咽癌患者50例，其中Ⅲ期28例、Ⅳ期22例。

1.3 标本收集和实验室检查 ①EVB-DNA荧光定量PCR试剂盒购自深圳达安生物技术公司，荧光定量PCR仪为MJ公司OPTICON2型，每个研究对象空腹抽取外周静脉血2 ml，加入EDTA抗凝管中，1600 g离心后分离上层血浆，置于-20℃冻存。每份血浆标本取50 μl用QIAamp Blood Kit试剂盒抽取血浆DNA。血浆中EVB-DNA含量计算如下:C:EVBDNA拷贝数(ml);Q:PCR扩增后计算机检测的原始DNA拷贝数;VDNA:抽取的DNA稀释液体积;VPCR:用于PCR扩增的DNA体积;Vext:用于抽取DNA的血浆体积;公式:C(ml)=Q(VDNA/VPCR)(1/Vext)［7］。血浆 EVB-DNA含量结果大于0 copies/ml为阳性。②常规的免疫酶法检测血浆VCA-IgA，滴度大于1∶40为阳性。

1.4 统计学方法 所有实验数据应用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，P＜0.05为差异有统计学意义。……