复方骨肽注射细菌内毒素的检查方法研究

冯 磊

中国食品药品检定研究院，北京 100050

骨肽及复方骨肽注射液均具有刺激成骨细胞增殖、调节骨代谢、促进新骨形成等多种药理作用，复方骨肽注射液是在骨肽注射液的基础上，采用现代生物工程技术，与全蝎提取液制成的复方肽类制剂，含有多种骨生长因子，具有消炎止痛，促进骨愈合、生长等作用。临床多用于骨折和骨科手术愈合及风湿、类风湿性关节炎、原发性骨质疏松等疾病的治疗等[1-3]。本品现有的质量标准的控制采用热原检查法，本研究确定了复方骨肽注射液的内毒素检查限值并研究其使用细菌内毒素检查法的可行性，为其质量标准提高提供依据。

1 资料与方法

1.1 仪器与试剂

细菌内毒素测定仪，型号BET-72（天津市天大天发科技有限公司）；鲎试剂（TAL，厦门鲎试剂实验厂有限公司，批号:100420，规格1.7 mL/支，湛江安度斯生物有限公司，批号 :1010142，检测范围 =10.00 ～ 0.03 EU/mL，1.25 mL/支）；细菌内毒素检查用水（BET水，中国食品药品检定研究院，内毒素含量＜0.005 EU/mL，规格:10 mL/支）；细菌内毒素国家标准品（NSE，中国食品药品检定研究院，批号:150600-200707，10 000 EU/支）；复方骨肽注射液（常州方圆制药有限公司，规格：5 mL∶ 75 mg，批号：20110219A，20110219B，规格：2 mL∶30 mg，20110313A，20110104A；南京新百药业有限公司，规格：5 mL∶75 mg，批号：110301，110302，规格：2 mL∶30 mg，批号：110105，110301。其他材料：漩涡振荡器（scientific industries），试管，移液管，试管架。试管等玻璃器皿严格按照《中国药典》2005年版二部附录“细菌内毒素检查法”中的相关要求经过浸泡、冲洗、干烤除细菌内毒素[4]。

1.2 方法

1.2.1 供试品细菌内毒素限值（L）的确定 根据公式：L=K/M，其中M为人用每公斤体重每小时最大剂量，依据药品使用说明书，10 mL溶于生理盐水后静脉滴注，则M为10 mL/h；……