HIF-1α在宫颈癌组织中的表达与临床特征的关系

梁少强 涂青松 黄 荣 蒋 军 姜武忠 袁 君 曾晓红 何 瀚 周菲菲

1.广东省佛山市第一人民医院肿瘤中心放疗科，广东佛山 528000；2.中南大学湘雅医院放疗科，湖南长沙 410008

恶性肿瘤细胞增殖迅速，使得细胞耗氧量不断增加，同时肿瘤组织新生血管往往不足导致肿瘤组织缺氧。缺氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）的转录因子在肿瘤适应缺氧的机制中起着关键的调控作用[1]。笔者采用免疫组织化学法检测宫颈癌组织中HIF-1α表达的水平，并进行临床追踪随访，研究HIF-1α在宫颈癌转移和预后中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集笔者所在科室2007年1月～2009年12月经病理确诊为宫颈癌患者的瘤体活检组织标本40例，均为鳞癌。年龄31～74岁，平均（51.2±2.9）岁；按1994年FIGO分期，Ⅰ期4例，Ⅱ期18例，Ⅲ期14例，Ⅳ期4例；病理分级，低分化7例，中分化27例，高分化6例。宫颈炎组织标本10例，宫颈非典型增生组织标本10例，两者均来自同时期的活检宫颈组织。

1.2 方法

试剂：兔抗人HIF-1α多克隆抗体（IgG）；抗原修复液Ⅰ及通用型SABC染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。采用常规免疫组织化学SABC法。切片常规脱蜡脱水，3%过氧化氢乙醇溶液阻断内源性过氧化物酶的活性，微波抗原修复，正常非免疫动物血清，室温下孵育10 min，滴加一抗HIF-1α，工作浓度均为1∶100，4℃冰箱中过夜，滴加生物素标记的第二抗体，置入37℃恒温箱中孵育30 min，加入链酶亲和素-生物素-过氧化物酶溶液，室温下孵育10 min，DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片，设阴性对照（以PBS代替一抗）以及阳性对照（已知的乳腺癌阳性反应组织）。……