人胚肺成纤维细胞复制性衰老的基因表达变化

李国栋 马 宏 童坦君 张宗玉

(北京大学基础医学院生化系，北京 100191)

环境和遗传是影响细胞和个体衰老进程的两大因素，尤其是遗传因素在衰老中发挥的作用正日渐得到学者们的重视。与肿瘤类似，衰老的启动与进展不是由单一基因操纵的，而是受到一系列基因的协同调节。早期研究发现衰老过程伴有一些基因表达的上调及另一些基因表达的下调，这些基因的变化可作为该组织或细胞衰老的特异性生物学标志。因此，寻找参与细胞或个体衰老过程的基因和基因调控网络是衰老基础研究的重要内容之一。基因芯片技术以核算杂交理论为基础，利用固定在芯片上的几千至几万条探针与样品的mRNA进行杂交，在一次实验中获取大量信息。基因芯片技术使用了光控固相化学、激光共聚焦等多项先进技术，实现了全部自动化，操作快速、简便。芯片技术的应用使得高通量分析细胞衰老等复杂基因调控网络成为可能。尽管近年利用芯片技术对组织以及细胞衰老的研究逐渐增多，但是针对人胚肺成纤维细胞(2BS)复制性衰老的基因筛查仍未见报道。在此，我们用含有4 096种人类基因的基因芯片，检测了2BS细胞在复制性衰老过程中的基因表达变化情况，结果显示衰老细胞与年轻细胞相比有117种基因表达的变化幅度在2倍以上，变化幅度在2.5倍以上的基因有46种，而且我们挑选的9种差异表达基因经RTPCR验证与芯片结果基本一致。

1 材料与方法

1.1 细胞培养 2BS细胞为衰老研究中心常规保存，细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基，于37℃、5%CO2条件下培养，细胞长至90%融合时，以1∶2分瓶传代。……