板蓝根总生物碱的含量测定方法研究

黄润芸，陈 凯，崔清华，李慧芬，张晓平，田景振

(山东中医药大学，山东 济南 250355)

板蓝根(Radix Isatidis)是十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根，具有清热解毒、凉血利咽的功效，临床上主要用于温热病热毒入于营血及温热病初起或外感风热诸症［1］。有研究表明板蓝根中总生物碱是其抗病毒有效物质［2］，目前板蓝根总生物碱的含量测定方法尚未见文献报道，本实验采用酸性染料比色法建立板蓝根总生物碱含量测定方法，并进行方法学考察，可以满足板蓝根总生物碱含量测定的需要。

1 仪器与试药

1.1 仪器 UV－2010型紫外可见分光光度计(日立公司)。

1.2 试药 4－(3H)－喹唑啉(Sigma公司，批号:20100521)，磷酸二氢钾(分析纯，天津科密欧，批号:20071126)，溴麝香草酚蓝(分析纯，天津科密欧，批号:20041024)，732离子交换树脂(国药集团化学试剂，批号:10024260)，蒸馏水，其他试剂均为化学纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取4(3H)－喹唑啉对照品10.0 mg，置100 mL容量瓶中，1%盐酸乙醇溶液溶解并定容，摇匀，作为对照品溶液(每1 mL含4(3H)－喹唑啉1 mg)。

2.1.2 供试品溶液的制备 称取板蓝根最粗粉20 g，加入一定量的80%乙醇水溶液，浸泡36 h，装入渗漉筒中(3×10 cm)。用15倍量80%乙醇水溶液渗漉提取，流速控制为1 mL·min－1。收集渗漉液，回收溶剂至近干，用80%乙醇溶液溶解并定容至50 mL容量瓶中，作为供试品溶液。

2.2 不同pH值缓冲溶液的制备

2.2.1 pH 4.5醋酸－醋酸钠缓冲液的配制 称取醋酸钠18 g，加冰醋酸9.8 mL，溶解后再加水稀释至1000 mL，即得。

2.2.2 pH 5.0 磷酸盐缓冲液的配制 取 0.2 mol·L－1磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

2.2.3 pH 6.0醋酸－醋酸钠缓冲液的配制 称取醋酸钠54.6 g，加 1 moL·L－1醋酸溶液 20 mL，溶解后加水稀释至500 mL，即得。……