常方方,董 吉,温一阳,周 云△
(1.河南卫生职工学院内科2教研室;2.河南省人民医院肿瘤科,河南 郑州 450003)
DDP、OXA、5-FU是临床胃癌化疗方案中的常用药物,DDP+5-Fu方案是胃癌一线基础治疗方案,但一般都是单铂与5-Fu静脉联用,少有双铂与5-Fu静脉联用的报道。铂类药物的剂量依赖性毒性和胃癌的药物多药耐药现象,严重影响了这类药物的效果[1]。本研究旨在采取多种实验方法观察以DDP、OXA为主联合用药对胃癌细胞的体外抑瘤活性,为开发高效低毒的临床化疗方案,最大限度地发挥铂类药物疗效,提高胃癌治疗效果提供科学的实验依据。
1.1 细胞及试剂 ①胃癌细胞株BGC-823;②药物:DDP注射液(30 mg/支)购自江苏豪森药业股份有限公司;OXA注射液(50 mg/支)购自成都世纪华洋制药有限责任公司;5-FU(250 mg/支)购自上海旭东海普药业有限公司。③试剂:四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO),均购自美国 Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 药物浓度设定 根据预实验结果,取4个不同的浓度组,:A组(OXA+DDP)剂量1~4分别为:3.125/1.562 5,6.25/3.125,12.5/6.25,25/12.5 ug/ml;B组(OXA+DDP+5-Fu)剂量1~4分别为:3.125/1.5625/15.625,6.25/3.125/31.25,12.5/6.25/62.5,25/12.5/125 ug/ml。
1.2.2 组别设计 设空白对照组、对照组和实验组。空白对照组:无细胞,只加等体积的PBS液,作空白调零孔。对照组:含细胞,只加等体积的培养液。实验组:含细胞,加入用培养液稀释的不同浓度A、B组的药物。
1.2.3 MTT法测定细胞生长抑制率 取对数生长期细胞常规消化并制成单细胞悬液,调整细胞浓度为4~5×104,接种于96 孔板中,每孔0.1 ml,培养24 h后,按实验设计加入药物,分别设实验组、对照组和空白对照组,每组设6个平行孔。37℃培养箱中继续培养48 h后,每孔加入MTT液20 μl,培养……