bFGF对人根尖牙乳头干细胞成脂分化影响的研究

吴家媛，贾 谦，何文喜，李玉成，况 蓉，倪龙兴，牛忠英

(1.第四军医大学口腔医学院，陕西西安710032;2.遵义医学院附属口腔医院，贵州遵义563003;3.北京解放军第306医院，北京100101)

根尖牙乳头干细胞(stem cells from the apical papilla，SCAP)是存在于年轻恒牙根端组织中的具有比牙髓干细胞(dental pulp stem cell，DPSC)更强的群体倍增能力、端粒酶活性、迁移率及成牙本质能力的一类间充质干细胞［1－2］。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对间充质干细胞(MSCs)具有诱导细胞趋化、促有丝分裂等作用，在MSCs早期分化和发育进程中发挥着重要的作用［3］。本课题组前期实验结果显示，bFGF在一定的浓度范围内能抑制SCAP的成骨分化，增加细胞的STRO－1、Nanog、Sox2、Oct4 Rex1的表达，从而推测bFGF可维持SCAP的干性(Stemness)［4］。多向分化能力是干细胞生物特性之一，其能力的强弱在某种程度上提示干细胞多分化潜能的强弱。bFGF是否在成脂分化中也发挥着同样的作用，尚未见文献报道。而且关于bFGF对MSCs成脂分化的作用，相关研究结果也并不一致［5－7］。故本研究以体外培养的SCAP为对象，初步探讨bFGF对SCAP成脂分化能力的影响，以期明确bFGF是否也能在成脂分化方向上维持SCAP的干性(Stemness)。

1 材料和方法

1.1 主要材料和仪器

高糖DMEM培养基 (Gibco，美国);胎牛血清(Hyclone，美国);谷氨酰胺、胰岛素、维生素C、DMSO 油红 O、BrdU(sigma，美国);IBMX、MTT(A-lexis，美国);吲哚美辛(武汉远成药业);相差显微镜(Leica DM 6000B)，Mastercycler PCR 仪(Eppendorf，德国);Ps250电泳仪(Savant，美国);BIO－RAD Gel－Doc 2000凝胶成像系统;分光光度计(eppendorf，德国)。

1.2 方法

1.2.1 根尖牙乳头干细胞(SCAP)的分离、培养及鉴定

收集16～22岁志愿者因正畸需要新鲜拔除的未发育完全的健康第三磨牙，立即用含双抗(100 U/mL青霉素，100 μg/mL链霉素)的 PBS液反复清洗，分……