马 娜,郭瑞珍
(遵义医学院珠海校区病理学教研室,广东 珠海 )
同源于皮肤表皮的恶性肿瘤鳞状细胞癌(skin squamous cell carcinoma.SCC)和基底细胞癌(skin basal cell carcinoma.BCC)是两种常见肿瘤,它们同属于非黑素性瘤。临床上,两种肿瘤的生物学行为大不相同,就肿瘤的侵袭转移能力而言,SCC浸袭转移能力很强,而BCC却几乎不发生转移。本研究拟通过检测两组肿瘤组织中Survivin、Kai1、Cx43的表达,探讨这些细胞因子对皮肤SCC和BCC特有生物学行为的影响。
1.1 实验标本 收集2003~2007年遵义医学院第一、第五附属医院病理确诊的SCC和BCC标本。其中35例为BCC,男性22例,女性13例,中位年龄56岁,头面部30例,胸腹部5例。18例为SCC,男性12例,女性6例;中位年龄57岁;头面部10例,四肢6例,躯干2例。所有标本均经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,光镜观察确诊。
1.2 主要试剂 Cx43 mRNA寡核苷酸探针原位杂交试剂盒,Kai1、Cx43多克隆抗体,购自武汉博士德公司,Survivin多克隆抗体,购自福州迈新公司。
1.3 实验方法 采用核酸分子原位杂交法检测Cx43 mRNA的表达,采用免疫组织化学方法(S-P法)分别检测Survivin、Kai1、Cx43蛋白的表达。
1.4 阳性结果判断标准 Cx43 mRNA以及Survivin、Cx43、Kai1三种蛋白阳性信号均呈棕黄色、颗粒状,Kai1蛋白阳性信号出现在细胞质和细胞膜中,其它检测指标阳性信号出现在细胞质中。阳性结果判定采用半定量积分法,根据每张切片的阳性细胞百分数及着色深浅计分。在400倍视野下,每张切片随机选取5个不同的视野,每视野计数100个细胞,分别记录每个视野的阳性细胞数量并计算其算术平均值。
1.5 统计学分析 全部资料运用SPSS 13.0软件包进行统计学分析。……