三叶因子2、表皮生长因子在大鼠胃溃疡愈合中的作用

张 静 房 涛 马义腾 吴靖芳 张江兰 张文静

(河北北方学院组织胚胎学教研室，河北 张家口 075000)

胃溃疡是老年人好发的疾病之一，其愈合是一个复杂的生理过程，包括了组织的重建和再生〔1〕。三叶因子2(TFF2)作为TFF家族中最早被发现的小分子多肽，与表皮生长因子(EGF)均属于黏膜屏障的修复因子〔2，3〕，研究二者在胃溃疡愈合过程的表达变化，对深入研究溃疡愈合机制及治疗等方面具有一定的参考价值。本研究通过建立大鼠实验性胃溃疡模型，动态检测胃黏膜TFF2、EGF蛋白及mRNA的表达变化。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 TRIzol、dNTP Mix购自北京赛百盛生物工程有限公司，TFF2、EGF、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)由北京赛百盛生物工程有限公司合成;白血病病毒(AMV)反转录酶(M9004)，RNAase抑制剂购自 Promega公司;2×Taq PCR体系购自北京盛旭百川生物工程公司，兔抗大鼠TFF2、EGF多克隆抗体购自武汉博士德生物技术有限公司;生物素-辣根过氧化物酶复合物(SP)9001试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.1.2 仪器 SIGMA3K30型低温高速离心机、UV-2000型紫外分光光度计(美国Labtech公司)、Mastercycler 5331 PCR扩增仪(Eppendorf公司)、DYC-31D型水平凝胶电泳仪(北京六一仪器厂)、凝胶分析系统(UVP GELDOC-IT，美国)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立及取材 雄性8周龄SD大鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)48只，体重180～230 g，分为实验性胃溃疡组(简称溃疡组，GUG，n=42)和正常组(NG，n=6)。用3 g/100 ml戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉大鼠，腹部剃毛，消毒，在无菌条件下(手术切口长约2 cm)暴露胃。在胃体前壁近胃窦处黏膜下注入0.01 ml冰醋酸，制成胃溃疡模型。正常组为正常大鼠，不做任何处理。……