针刺治疗脑梗死对神经元保护作用机制的实验研究

何娜 朱春雷 何欣

关于脑梗死的治疗方法很多，作为传统医学的针刺治疗法以其独有的优势倍受青睐。以往研究表明：针刺对脑缺血的治疗作用是通过减少脑缺血后神经元坏死实现的。近来研究发现，针刺对脑缺血后神经元的凋亡亦有抑制作用。本实验应用免疫组化的方法，对针刺治疗脑梗死后梗死灶周围组织中的细胞凋亡蛋白Bcl-2与Bax在24h的变化进行检测，从而为针刺治疗对抗脑缺血损伤作用机制的研究提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 健康雄性Wistar大鼠30只，体重200～250g之间（由吉林大学实验动物中心提供）。随机分为假手术组、缺血组和针刺组，每组10只。

1.2 主要试剂及仪器 Bcl-2鼠抗人单克隆抗体和Bax兔抗人多克隆抗体(美国Sant Cruz公司)，稀释度分别为1:50和1:150；SP试剂盒(美国Zymed公司)；SDZ-Ⅱ型电针治疗仪（华佗牌，上海医用仪器厂）；1%戊巴比妥。

1.3 方法 大脑中动脉梗死模型的建立:除假手术组外，各组均根据改良的Koizumi[1]线栓法制作大鼠MCAO(大脑中动脉阻断)模型。待大鼠清醒后选用Bederson[2]的方法观察大鼠的体征，出现下列体征表明模型制作成功：①右侧出现horner征；②左前肢瘫痪，将鼠尾提起大鼠不能充分伸展左前肢，当大鼠左旋时左前肢拖在腹下，与右前肢交叉成剪刀状。

穴位定位与电针方法:根据动物穴位图谱[3]，选取动物模型的外关和足三里两穴。分别于造模后15min进行30min电针干预，针刺深度1mm；以医用1寸毫针针刺入相应穴位，于针柄处接SDZ-Ⅱ型电针治疗仪。刺激参数：疏波4HZ，密波20HZ，脉冲宽度0.5ms；输出电压2～4V，输出电流4～6mA，强度以鼠尾轻颤为度。……