冯素芳
患者,男,62岁,汉族,既往无输血史,有糖尿病史,2011年4月因发热,便血,下肢疼痛入我院治疗。血常规:HB:58 g/L,RBC:1.93×1012/L,申请悬浮红细胞2 U,血浆400 ml。复检血型时发现正反定型不一致,正定型为AB型,反定型与A细胞,B细胞,O细胞均凝集,正反定型不符,经近一步检测,证实为AB型,正反定型不一致是由于其自身含有冷凝集素所致。
1.1 试剂与仪器 抗A、抗B单克隆血清(长春博德,批号:20100712);反定型试剂红细胞:自制;筛选试剂红细胞(长春博讯,批号:20110206);抗Ig-G,C3d、抗IgG、抗C3d(上海医药,批号:20100608);凝聚胺试剂(珠海贝索,批号:110053);抗人球蛋白交叉配血卡(长春博讯,批号:20100608);BASO-2002-2离心机。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清学离心机(长春博研)。37℃水浴箱。
1.2 血型鉴定 取干燥洁净的试管三支,分别加入抗A、抗B、抗AB血清各两滴,再分别加入患者3%红细胞悬液一滴,混合;另取干燥清洁的试管3支,各加入患者血清2滴,再分别加入A、B、O型3%红细胞悬液1滴,混合;另取一只试管,加入患者血清2滴及患者红细胞悬液1滴,混合。1 000 r/min,1 min。镜下观察。将患者正反定型试管均放入37℃水浴箱中10 min,取出轻轻混匀观察记录结果。
1.3 吸收冷凝集素 用37℃0.9%氯化钠溶液洗涤患者红细胞3次,然后用患者的血清与等体积3洗后的压积红细胞混合,置4℃冰箱中过夜,次日将该血清与A细胞,B细胞,0细胞及自身细胞在20℃反应,记录结果。
1.4 直接抗人球蛋白实验 取洁净干燥试管三支,分别加入抗-IgG,C3d、抗-IgG、抗-C3d血清各1滴,各加入患者洗涤3次后配制的3%红细胞悬液1滴,混合,1 000 r/min,离心1 min。
1.5 抗体筛选试验 按照不规则抗体筛查操作说明书进行。……