柴苓汤对慢性环孢素A肾病大鼠肾脏细胞增殖的影响

王 霞， 孙东云， 王香婷， 王 筝， 王聪慧， 许庆友*

（1.河北医科大学中医学院 河北 石家庄 050091；2.河北医科大学中西医结合学院，河北 石家庄 050091）

环孢素A(cyclosporine A，CsA)是目前用于器官移植抗排斥反应以及自身免疫性疾病治疗的一线药物，但其肾毒性所导致的慢性损伤限制了它的长期临床应用。近30%的环孢素A长期使用者会出现显著的肾毒性反应［1］，其病理改变主要表现为肾间质纤维化。已有研究显示肾间质病变与细胞过度增殖有关，故抑制细胞增殖有助于减缓肾纤维化的进展。本实验通过复制慢性环孢素A肾病模型，探讨柴苓汤是否通过调节细胞增殖这一途径减轻环孢素A慢性肾损伤。

1 材料与方法

1.1 药物及试剂 柴苓汤，颗粒型，3g/袋(每1 g制剂相当生药量0.67 g)，购自日本TSMURA株式会社。制备工艺:柴胡7 g、黄芩3 g、半夏5 g、人参3 g、甘草2 g、生姜1 g、大枣3 g、猪苓 3 g、桂枝3 g、白术3 g、茯苓3 g、泽泻5 g，上述药味共煎后提取6 g，加入赋形剂至9 g。实验时用蒸馏水配制成质量浓度为0.3 g/mL的溶液。缬沙坦由北京诺华制药有限公司提供，批号800994。环孢素软胶囊由华北制药集团新药研究发展有限责任公司提供，批号090401，用橄榄油将其配制成质量浓度为15 mg/mL的溶液，备用。免疫组化试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。RT-PCR试剂盒由美国Invitrogen公司提供。Western Blot PCNA、FN抗体由美国LABVISION公司提供。流式细胞术PCNA抗体采用武汉博士德生物有限公司产品。

1.2 实验动物及分组 40只雌性清洁级SD大鼠，8周，体质量(200±10)g，河北医科大学动物实验中心提供，许可证号scxk(冀)2008-1-003。随机分为对照组、模型组(环孢素A)、柴苓汤组、缬沙坦组，每组10只。……