m iR-34a通过调控YY1抑制肾癌细胞的增殖及侵袭

王明丽， 李 智， 徐晋豫， 翁文浩， 许闪闪

(同济大学附属上海市第十人民医院检验科，上海 200072)

m iR-34a通过调控YY1抑制肾癌细胞的增殖及侵袭

王明丽， 李 智， 徐晋豫， 翁文浩， 许闪闪

(同济大学附属上海市第十人民医院检验科，上海 200072)

目的 探讨miR-34a在肾癌组织中表达、miR-34a对人肾癌ACHN细胞增殖和侵袭的影响及调控机制。方法 实时聚合酶链反应(PCR)检测miR-34a在20例肾癌及癌旁组织中的表达;采用脂质体转染法将miR-34amimics转染入肾癌ACHN细胞中，试验分空白对照组、阴性对照组、miR-34amimics转染组。实时PCR检测转染24 h后miR-34a表达量;噻唑蓝(MTT)试验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Transwell及Matrigel检测细胞侵袭能力;实时PCR和蛋白质印迹(Western blot)技术检测转染后转录因子YY1表达水平。结果 与癌旁组织相比，20例癌组织中miR-34a平均表达量为1．06±0．67，显著低于癌旁组织(1．62±0．83，P＜0．01);转染后24 h，miR-34a mimics转染组的 miR-34a表达量为157．04±13．01，较阴性对照组显著上调(P＜0．01);miR-34amimics转染组细胞增殖能力显著降低(P＜0．01)，细胞生长被阻滞在G0/G1期;细胞侵袭能力明显减弱(P＜0．01);转染miR-34amimics后YY1基因在mRNA表达无明显变化(P＞0．05)，蛋白水平下调。结论 miR-34a在肾癌中低表达，可能与肾癌的发生有关;miR-34a调控YY1的表达可能是抑制肾癌细胞生物活性的重要机制之一。

miR-34a;YY1;细胞增殖;侵袭;肾癌

肾癌占成人恶性肿瘤的2% ～3%，其中以肾透明细胞癌最多见［1］。由于肾透明细胞癌对化疗、放疗均不敏感，免疫治疗也难以取得理想效果，基因治疗已成为研究的热点。

microRNA是一种长约22个核苷酸的小分子RNA，广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列 RNA。自2002年 Calin等［2］首次报道microRNA异常与肿瘤相关后，越来越多的研究显示microRNA参于肿瘤细胞发育、分化、凋亡和增殖等的调控，在肿瘤发生和发展中起重要作用。……