上调SMYD3对人胆管癌FRH0201细胞中DNMT3B表达及细胞增殖的影响*

程 帝， 李志花△， 陈汝福， 郭 宁， 廖巧芳， 郑礼平， 周泉波， 周嘉嘉

(中山大学孙逸仙纪念医院 1肿瘤科，2肝胆外科，广东 广州 510120)

1000-4718(2012)03-0415-05

2011-10-31

2012-01-09

国家自然科学基金资助项目(No.30872485)

△通讯作者Tel:020-81332107；E-mail: chenrf63@163.com

上调SMYD3对人胆管癌FRH0201细胞中DNMT3B表达及细胞增殖的影响*

程 帝1， 李志花1△， 陈汝福2， 郭 宁2， 廖巧芳1， 郑礼平1， 周泉波2， 周嘉嘉2

(中山大学孙逸仙纪念医院1肿瘤科，2肝胆外科，广东 广州 510120)

目的研究人胆管癌细胞株FRH0201中SET和MYND结构域含有蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3，SMYD3)过度表达对DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B，DNMT3B)表达及细胞增殖能力的影响。方法瞬时转染SMYD3真核表达质粒后， RT-PCR检测细胞中DNMT3B mRNA水平的变化；Western blotting检测细胞中DNMT3B蛋白水平的变化；CCK-8检测细胞增殖能力的改变；流式细胞术检测细胞周期的改变。结果以未处理组为对照，胆管癌细胞FRH0201在转染pEGFP-C3-SMYD3质粒后，DNMT3B蛋白及mRNA表达均显著上升(P<0.01)；细胞的增殖能力显著提高、细胞增殖速度加快(P<0.05)；进入G2/M期的细胞明显增多(P<0.05)。结论过度表达SMYD3，可引起细胞中DNMT3B的表达上调并增强细胞增殖能力。

FRH0201细胞； 甲基化； 组蛋白甲基化转移酶； DNA甲基化转移酶

SET和MYND结构域含有蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3，SMYD3)是一种具有组蛋白H3-K4特异性甲基化活性的甲基化转移酶。SMYD3可特异性结合下游靶基因启动子区域5′-CCCTCC-3′序列，发挥转录调节活性，上调靶基因的表达[1]。研究发现，SMYD3在结肠癌、肝癌、乳腺癌及肝门部胆管癌中均呈现过表达[1-3]。DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B，DNMT3B)是DNA甲基化转移酶家族成员之一，表现出从头甲基化的作用。DNMT3B在正常的成体细胞中丰度较低，主要存在于胚胎细胞及肿瘤细胞中[4-5]。本研究通过上调细胞中SMYD3的表达，探讨过度表达的组蛋白甲基化转移酶SMYD3能否引起DNMT3B的表达上调，及对肝门部胆管癌细胞增殖活性的影响。

材 料 和 方 法

1材料

人肝门部胆管癌细胞株FRH0201由山东大学齐鲁医院吴小鹏教授惠赠；……