树突状细胞DNA多价疫苗抗日本血吸虫感染作用机制的研究＊

血吸虫病是一种流行广泛、严重危害人体健康并影响畜牧业生产的人兽共患寄生虫病。作为吡喹酮化疗的补充，血吸虫病疫苗的研究是一种更有效的控制措施。血吸虫病疫苗的研究已有半个多世纪，历经死疫苗、减弱活疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗四个阶段。尽管血吸虫病疫苗的研究工作已取得一定的进展，但离实际应用尚有一定的距离，增强DNA疫苗的免疫效果便成为当前血吸虫病疫苗研究的焦点，有必要进一步加强对血吸虫的生物学特性、血吸虫与宿主的相互关系以及混合抗原、细胞免疫、疫苗免疫方法、免疫途径、佐剂应用等基础方面的研究［1］。

树突状细胞（DC）是体内功能最强的一种专职抗原提呈细胞，在机体免疫应答中起着核心作用。由于其独特的功能，DC目前广泛应用于抗感染、肿瘤、自身免疫病和移植免疫等［2－3］。作者此前已成功地将Sj26、Sj23和Sj14基因分别转染至小鼠DC，并在DC中得到稳定表达，联合免疫具有明显的协同或增强作用，本研究在此基础上对其保护性免疫机制进行了探讨。

1 材料与方法

1.1 材料 DC细胞株MTSC4（北京医科大学免疫学系陈慰峰教授惠赠），常规方法培养传代；BALB/c小鼠，6～8周龄、雌性（武汉市生物制品研究所）；小鼠白细胞介素－4（IL－4）和干扰素－γ（IFN－γ）检测试剂盒（英国BD Biosciences Pharmingen公司）；噻唑蓝MTT（美国Invitrogen公司）；二甲基亚砜（DMSO，美国Sigma公司）；HRP标记羊抗鼠IgG（美国Bio－Rad公司）；RPMI－1640培养液（美国Gibco公司）；胎牛血清（FCS，杭州四季青公司）。

1.2 方法

1.2.1Sj26基因转染 DC、Sj23基因转染 DC、Sj14基因转染DC、pcDNA3转染DC的制备与培养 参照文献［4］制备，按常规方法培养传代。……