廖 凯,杨代勤,阮国良,孟 冉,袁汉文
(长江大学动物科学学院,湖北 荆州 434025)
黄鳝ERα cDNA的克隆与序列分析
廖 凯,杨代勤,阮国良,孟 冉,袁汉文
(长江大学动物科学学院,湖北 荆州 434025)
运用RT-PCR和5’RACE技术获得黄鳝(Monopterusalbus)ERα cDNA,长度为1989bp,其开放阅读框(ORF)包含1518个碱基序列,共编码506个氨基酸。5’UTR长度为152bp,获得的3’UTR长度为319bp。蛋白质序列同源性分析显示,黄鳝ERα与鲈形目鱼类ERα相似性较高,与舌齿鲈(Dicentrarchuslabrax)、大口黑鲈(Micropterussalmoides)、石斑鱼(Epinepheluscoioides)、金头鲷(Sparusaurata)、尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)和底鳉(Fundulusheteroclitus)相似性分别为74.9%、73.5%、68.8%、68.2%、66.8%和65.6%。蛋白质序列分析发现,黄鳝ERα 175~257和308~456个氨基酸分别为雌激素受体超家族功能域DBD和LBD。进化树分析显示,黄鳝ERα和其他鱼类ERα聚为一支。
黄鳝(Monopterusalbus);ERα;克隆;序列分析
雌激素(estrogen)是具有广泛生理功能的性类固醇激素,它在调节生长发育、繁殖和各种疾病发生中起着重要作用。雌激素的各种生理功能通过雌激素受体(estrogen receptors,ERs)介导来实现。哺乳动物ERs存在2种亚型,ERα和ERβ,它们是位于不同染色体上的不同基因编码的产物。由于基因组复制事件的发生,硬骨鱼类ERs种类比哺乳动物更为复杂,目前发现ERβ在大多数硬骨鱼类中存在异型体(ERβ1和ERβ2),同时ERα异型体(ERα1和ERα2)在虹鳟(Oncorhynchusmykiss)[1]和倒刺鲃(Spinibarbusdenticulatus)[2]等鱼类中已有报道。ERs作为核受体超家族一员,主要通过与核内雌激素反应元件(estrogen response elements,EREs)结合而调控靶基因的转录。
雌激素在性腺发育、性别分化和繁殖中起着关键作用。在鱼类中,ERs在精巢和卵巢有着广泛的表达[3-6],这表明ERs在鱼类繁殖和性腺发育中起着重要作用。对鱼类ERs基因的研究将有助于理解雌激素在鱼类繁殖中的生理功能及其作用机制。……