在Hs578T乳腺癌细胞由Cx43组成的细胞缝隙连接对阿霉素细胞毒性的影响

蒋国君，童旭辉，祝晓光，董淑英，韩 溪，郑 超

(蚌埠医学院药学系药理学教研室，安徽蚌埠 233030)

乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一，化疗是常见的治疗手段。阿霉素(adriamycin，ADM)易产生心脏毒性、骨髓抑制、消化道反应等严重的不良反应，因此寻找增加乳腺癌细胞对ADM敏感性同时降低机体不良反应的方法，对减少耐药、增加ADM的疗效和扩大其临床应用范围具有重要的指导意义。

细胞缝隙连接(gap junction，GJ)是细胞间进行物质交流的主要连接通道，由特殊的通道蛋白——连接蛋白(connexin，Cx)组成。连接蛋白通道介导的细胞间信号转导对于细胞正常生理状态的维持以及机体内环境的稳定非常重要［1］。

目前已经证实，在人正常的乳腺组织中，Cx43是乳腺上皮细胞表达的特异性连接蛋白之一［2］，具有抑制肿瘤生长的作用，并且有研究证明，Cx43的存在可以增强化疗药物诱导的细胞凋亡作用［3］。在乳腺癌细胞中Cx43基因表达常常异常或者缺失［4］。因此，国内外许多学者也将提高肿瘤间GJIC功能作为了肿瘤治疗研究的新方向［5－6］。

本实验主要研究维甲酸(ratinoic acid，RA)、油酸酰胺(oleamide)和 18-α-甘草次酸(18-α-GA)对乳腺癌Hs578T细胞中Cx43表达的影响，进而观察由Cx43形成的GJ对抗肿瘤药物ADM细胞毒性的影响。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1 细胞 细胞系Hs578T购于中科院上海细胞库。

1.1.2 试剂 阿霉素、胰蛋白酶(Typsin)、MTT、二甲基亚砜(DMSO)均为美国Sigma公司产品;DMEM高糖培养基、新生牛血清、荧光染料CM-Dil、calcein-AM(Molecular Probes)均为美国Gibco公司产品。其他常用试剂均为国产分析纯级。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 乳腺癌细胞 Hs578T采用DMEM高糖培养基，含有10%(V/V)新生牛血清，100 kU·L－1青霉素，100 mg·L－1链霉素，置于37℃、含体积分数5%CO2以及饱和湿度的细胞培养箱中培养。……