荧光原位杂交检测乳腺癌Her-2基因的临床病理意义

叶 蓉 王淑华

怀化市第一人民医院，湖南怀化 418000

目前，乳腺癌已经成为女性最为常见的一种恶性肿瘤，发病率在逐年增加。 根据国外的最新统计显示，国外乳腺癌患者占恶性肿瘤中的30%，是恶性肿瘤的第一位[1]。 免疫组织化学法的操作简单方便，价格比较低，是应用比较广泛的一种方法，但是假阳性比较高。 因此才需要荧光原位杂交法再次检查，得到准确的Her-2 基因的状态，为诊断提供更为可靠的依据，对于治疗上也可以依据准确的Her-2 基因的状态来选择最合适的治疗方案。该院针对这一现象，选取2009年3月—2011年3月手术切除的乳腺癌标本48 例，对其采用荧光原位杂交法进行检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该院2009年3月—2011年3月手术切除乳腺癌标本48例，年龄在35～60 岁，平均年龄47.5 岁。 经过10%的中性甲醛固定，然后用常规的石蜡包埋，进行切片，HE 染色显示结果，证实确实为乳腺癌。

1.2 方法

采用荧光原位杂交法：将标本用10%的中性甲醛固定，固定于甲醛6～48 h，然后用常规的石蜡包埋，并且标出杂交区域。 然后进行切片处理，用65～75 ℃进行烤片。 再使用二甲苯脱蜡呈水化，室温下以100%、85%和70%的乙醇进行2 min 的脱水，去离子水中浸泡3 min。在50 ℃的时候，浸入30%酸性亚硫酸钠30 min，然后将用缓冲液洗片2 次，再放入37 ℃的蛋白酶K 溶液中，浸泡5～10 min。 再次进行洗片，在室温下放入0.1 mol/L HCL，浸泡5～10 min。 再次进行洗片， 然后将玻片放在-20 ℃、70%、85%和100%的乙醇中进行脱水，浸泡2 min 左右。 室温下再浸入丙酮，浸泡2 min，再取出进行自然风干，制作成干片。 然后进行烤片到56 ℃后，滴入探针混合液到杂交区，盖玻片后采用蜡胶进行封边处理。……