不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2和Oct4蛋白的表达*

史立纲，吕新全，燕 丽，徐正顺，李惠翔

郑州大学第一附属医院病理科 郑州450052

#通讯作者，1960年7月生，博士，教授，研究方向:肿瘤病理，E－mail:huixiang19@yahoo.com.cn

肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一群特殊的细胞，具有自我更新、多向分化、高致瘤性等特点。由于其具有对放化疗的抵抗性而不易被常规治疗手段根除，造成肿瘤治疗后复发。Oct4 在胚胎细胞中表达，是细胞分化全能性的标记［1］，表达Oct4 的细胞可能是引起肿瘤发生的起始细胞［2］。Sox2 是Sox家族成员之一，在维持干细胞的多能性方面发挥重要作用［3］。乳癌干细胞的研究近年来取得了很大的进展［4］。Perou 等［5－6］提出乳癌基因分型这一全新概念，将乳癌分为Luminal A、Luminal B、HER－2、和Basal－like 4 种分子亚型。Carey 等［7］的研究证实，基因分型与乳癌患者预后有关。作者应用免疫组化SP 法检测不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中肿瘤干细胞标志的表达情况，以期从肿瘤干细胞角度对各亚型的生物学行为进行探讨。

1 材料与方法

1.1 标本来源及分型 标本选自郑州大学第一附属医院乳腺外科2008年6月至2010年3月手术切除后病理证实的乳腺浸润性导管癌的标本共120例;患者均为女性，年龄24～75 岁，首次发病，术前未进行放化疗和其他免疫治疗。其中Luminal A 45例、Luminal B 29例、HER－2 27例 和Basal－like 19例。

1.2 乳腺浸润性导管癌组织中Oct4 和Sox2 蛋白表达的检测 采用免疫组化SP 法。Oct4、Sox2 单克隆抗体(即用型)及SP 试剂盒均为美国Zymed 公司产品。乳癌组织常规石蜡包埋，4 μm 厚连续切片。按SP 试剂盒说明书进行操作。DAB 显色，苏木精复染、封片。用已知Oct4、Sox2 表达阳性的精原细胞瘤组织切片和CK5/6 表达阳性的正常乳腺组织切片作阳性对照，用PBS 代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定［8］镜下Oct4、Sox2 阳性为位于细胞核内的棕黄色均匀细颗粒。CK5/6 阳性表达主要在细胞质。根据阳性细胞所占比例:阳性细胞数＜10%为1 分，10%～为2 分，50%～75%为3 分，＞75%为4 分; 根据显色程度判断阳性强度:标本无着色为0 分，淡黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3 分。两者得分乘积0～2 分为－，3～4 分为+，6～8 分为，8 分以上为。

1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0 处理数据。应用秩和检验比较不同分子亚型乳癌组织中Oct4 和Sox 蛋白表达的差异，应用Spearman 分析检测乳癌组织中Oct4 和Sox 蛋白表达的相关性，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Oct4、Sox2 蛋白的表达 见图1、表1。

图1 不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Oct4(A)、Sox2(B)蛋白的表达(SP，×400)

2.2 乳腺浸润性导管癌组织中Oct4 与Sox2 蛋白表达的关系 见表2。

表1 不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Oct4、Sox2 蛋白的表达

表2 乳腺浸润性导管癌组织中Oct4 与Sox2 蛋白表达的关系

3 讨论

Oct4 基因定位于染色体6q21.3，属于Pou 区转录因子家族［9］，其表达于卵母细胞、原始生殖细胞和胚胎干细胞，但在其分化的子代细胞中不表达［10］，提示其与细胞的多能性分化密切相关; 可能是一个特异的分化全能性基因标记或者是分化全能性的必需基因。既往研究［11］发现其在精原细胞瘤、中枢系统生殖细胞肿瘤、卵巢无性细胞瘤和胚胎性癌中表达。有学者［12］发现Oct－4 表达水平与一些上皮性恶性肿瘤(如胰腺癌和膀胱癌等)的发生和生物学行为关系密切，阳性表达者预后较差。有研究［11］报道在散发性乳癌中，Sox2 常优先表达于“基底型”乳癌中，表明Sox2 可能在调控乳癌的未分化状态中发挥作用。

依据特异基因表达状态进行分子亚型分类是为乳癌分型的新观点，在预测乳癌复发转移风险、评估治疗反应及判断生存预后等方面比传统的依据肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移等更准确［13］。在预后比较上，Luminal A 较好，Luminal B 其次，HER－2较差，Basal－like 型乳癌患者预后最差［14］。该研究结果显示Oct4 和Sox2 在乳癌亚型中阳性表达率明显不同，以Basal－like 型最高，说明该型中多能性或全能性细胞比例高，与Rodriguez－Pinilla 等［11］的发现一致。由于肿瘤干细胞分化极低，更容易适应不同的机体环境，而且其具有较高的耐药性，致使化疗疗效较差，因此推测含有乳癌干细胞数量多的乳癌亚型其预后也将较差，这可能是Basal－like 型乳癌的临床预后最差的原因之一。

作者观察了乳腺浸润性导管癌中Oct4 和Sox2蛋白的表达之间的关系，结果表明癌组织中Oct4 和Sox2 的表达呈正相关，提示Oct4 和Sox2 可能协同作用，维持胚胎干细胞自我更新以及多向分化能力。

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