二苯乙烯苷对LPC 损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制*

张燕堂， 张 颖， 郑 文， 杨 华， 王家富， 商战平△

(泰山医学院1校医院，2放射学院，4免疫学教研室，5病理生理学教研室，山东 泰安271016;3山东省交通医院检验科，山东 济南250031)

心脑血管疾病是危害人类健康最常见的病症之一，特别是动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)疾病所导致的并发症和死亡率迅速增多，目前已成为全球人口死亡的首位原因，对人体造成的危害越来越引起人们的重视。研究表明［1］，伴随以一氧化氮(nitric oxide，NO)生物利用度降低为主而导致内皮损伤被认为是引起AS 的始动环节。有研究表明非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine，ADMA)与L -精氨酸竞争性抑制NO 的合成，在调节NO 合成中具有重要作用，它通过影响NO 合成而导致血管内皮功能障碍［2］，研究发现传统中药何首乌中最主要有效的活性成分二苯乙烯苷(2，3，5，4'-tetrahydroxysilbene -2-O-β-D-glucoside，TSG)具有明显的促进血管内皮细胞增殖的作用［3］，本研究旨在探讨TSG 对损伤的血管内皮细胞的保护作用及其机制。

材 料 和 方 法

1 主要试剂及仪器

人脐静脉血管内皮细胞株、细胞凋亡试剂盒均购自南京凯基生物科技发展有限公司;胰蛋白酶和溶血磷脂酞胆碱(lysophosphatidylcholine，LPC)均购自Sigma;DMEM 液体培养基和胎牛血清购自Gibco;ADMA试剂盒购自ID;MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(cell proliferation and cytotoxicity assay kit)、NO 试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;人血管性血友病因子(vWF)ELISA 检测试剂盒购自北京奇松生物科技有限公司，二苯乙烯苷由中国人民解放军泰安第88 医院药剂科馈赠;其它生化试剂均为进口分装或国产分析纯。FACSCalibur 流式细胞仪(BD);Infinite F200 多功能酶标仪(TECAN)。

2 细胞的培养及其生物学特征

细胞经培养、传代并经人von Willebrand 因子鉴定其含量为100.02 ±2.94，将第3、4 代用于实验。……