中药复方和复方制剂治疗肺癌作用机制的实验研究进展

孙超龙，谢慧珺

(河南中医学院，河南 郑州450008)

原发性支气管肺癌(primary bronchogenic carcinoma)，简称肺癌(lung cancer)，为起源于支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤［1］。目前，肺癌的发病率和死亡率不断上升［2］，我国的一项回顾调查资料［3］显示:肺癌死亡率至2007年升至30.84/10万，已取代肝癌成为中国首位恶性肿瘤死亡原因。在治疗上，西医针对于早期肺癌以手术为主，针对于中晚期肺癌，以放、化疗为主。然而，大多数肺癌患者确诊时已属于中、晚期，手术的机会大为减少，而且单纯放、化疗毒的副作用相当大，给患者带来很多痛苦［4］。大量的临床实践［5］证明:中药复方和复方制剂有良好的抗肺癌作用，可以延长中晚期肺癌患者的带瘤生长时间，提高其生存质量，减少放、化疗所带来的副作用。本文对近年来中药复方和复方制剂治疗肺癌机理的实验研究进行概述，以期为今后的进一步研究提供依据。

1 细胞毒作用

细胞毒作用是指对细胞的直接杀伤作用，中药复方和复方制剂可以作用于癌细胞生长的不同阶段，使癌细胞停止于增殖周期中的某一环节，引起死亡或破坏癌细胞膜引起细胞自溶［6］。郑璐玉等［7］筛选出麦门冬汤合千金苇茎汤的8个有效部位，将其作用于非小细胞肺癌H460和正常人胚肺成纤维细胞HFL－1，结果发现6个部位对NCI－H460细胞有显著的毒作用。邹玺等［8］采用3种方法对克瘤丸进行提取，以MTT法观察不同浓度克瘤丸作用下人肺癌细胞株A549的生长情况，结果表明:当克瘤丸组合提起剂浓度在5 mg/mL时对肺癌细胞有显著的杀伤作用。

2 影响细胞生长周期

肿瘤的发生与细胞周期调控失衡有密切关系。崔德利等［9］选取六君二陈解毒汤及其拆方六君二陈汤、半夏陈皮汤和清热解毒汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠进行干预治疗，运用流式细胞仪测定诸方对肿瘤细胞周期和凋亡的影响。结果表明六君二陈解毒汤及其拆方皆可干预Lewis肺癌移植瘤肿瘤细胞周期，使阻滞在G0/G1期的细胞比例增加，进入S期的细胞减少，从而抑制Lewis肺癌细胞的增殖。曹勇等［10］采用流式细胞术观察健脾补肾解毒方不同剂量药物血清对人肺腺癌A549细胞周期的影响，结果发现健脾补肾解毒方含药血清能提高G0/G1期细胞比例，降低S期细胞比例，抑制A549细胞的增殖周期。闫瑢玓等［11］制备小鼠Lewis肺癌模型，观察肺抑瘤合剂对肺癌的抑制作用及其对肺癌组织细胞cyclinD1表达的影响，结果表明肺抑瘤合剂可通过降低肿瘤细胞cyclinD1的表达使肿瘤细胞停止于G1期，从而起到抗肿瘤的作用。

3 调控细胞增殖与凋亡相关基因的表达

目前的实验研究［12］表明:中药复方及复方制剂可通过调控Bcl-2/Bax基因和肿瘤转移相关基因的表达抑制肺癌的增值和转移。梁朝晖［13］等运用细胞凋亡原位末断标记及免疫组化法等分析中药扶正祛邪复方对小鼠Lewis肺癌细胞周期及凋亡的影响，发现中药复方可下调bcl-2的表达使肺癌细胞凋亡。王三虎［14］等制备小鼠Lewis肺癌模型，以免疫组化法检测润肺散结胶囊(RSC)对肺癌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响，结果表明RSC可通过影响肺瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达促进细胞凋亡。郑翠娥等［15］用免疫组化法测定C57BLP6纯系小鼠灌服肺抑瘤合剂后p16p53、cyclin的表达，发现表明肺抑瘤合剂配合化疗能有效抑制肿瘤细胞cyclinDl、p53的表达，增强p16的表达。贾彦焘等［16］运用MTT法测定肺一丸对La-795肺腺癌细胞增值的抑制作用，采用PCR-ELISA法测定细胞端粒酶活性，结果表明肺一丸抑制肿瘤细胞增殖的机制之一可能是其降低了肿瘤细胞端粒酶的活性。赵晓珍等［17］采用Real-time PCR及Western blot方法检测肺岩宁血清对 E-Cadherin、N-cadherin、Fibronectin、Vimentin等表达的影响，结果表明，肺岩宁方可通过上调E-Cadherin、下调N-cadherin、Fibronectin和Vimentin的表达达到抑制肺癌转移的作用。

4 影响细胞微环境

基质金属蛋白酶(MMPs)的表达和活性的增高与肿瘤的侵袭和转移密切相关，并影响肿瘤生长的多个环节［18］。某些黏附分子(如E-cad)和某些黏附因子(如CD44、CD54)的表达在肿瘤细胞在侵袭转移过程中也起着重要的作用［19］。中药复方和复方制剂可以通过抑制MMPs的表达和活性、干预细胞粘附因子(CAM)改变细胞微环境，从而抑制恶性肿瘤的生长和转移。王治宽等［20］用免疫组织化学法检测中药参七汤对基质金属蛋白酶9(MMP-9)影响，结果发现中药参七汤能通过下调肺癌小鼠肺组织MMP-9的表达，减少肿瘤的转移和复发。蒋士卿等［21］研究发现益肺清化膏可有效地提高E-cad的表达，降低CD44、CD44v6的表达水平，从而增加肿瘤细胞间的粘附能力，降低肿瘤细胞脱落进入周围组织和血管的几率，影响肿瘤细胞的迁移和运动。孙宏新等［22］采用免疫组化法检测消瘤保肺丸作用下Lewis肺癌细胞表达E－cad、CD44V6的情况，结果发现消瘤保肺丸可通过提高E-cad和降低CD44V6的表达水平达到抗肿瘤转移的目标。

5 抑制肿瘤血管形成

肿瘤血管生成是肿瘤细胞生长和转移的基础，抗肿瘤血管生成的治疗策略是对肿瘤血管调控因子及其作用环节进行干预。中药复方和复方制剂可通过抑制VEGF、COX-2等血管生长因子达到抑制肿瘤生长和转移的目的［19］。韩志鹏［23］等通过检测荷S180瘤小鼠灌服中药复方抑瘤饮后不同时间点肿瘤组织内VEGF、VEGFR-2和ES等的动态变化，发现抑瘤饮可以通过下调VEGF、VEGFR-2和上调ES表达抑制肿瘤组织内血管生成而抗肿瘤。刚宏林等［24］运用S-P免疫组化法检测灵芪胶囊对Lewis肺癌荷瘤小鼠bFGF、COX-2表达的影响，结果发现灵芪胶囊可通过下调bFGF和COX-2减少血管内皮细胞的增殖影响肿瘤生长和浸润。王中奇等［25］建立C57BL/6小鼠肺癌模型观察肺岩宁方及其组分对小鼠Lewis肿瘤MVD与MMP-2等表达的影响，发现肺岩宁方中的抗癌和补肾中药有抑制血管生成的作用。王瑞平［26］等研究发现，克瘤丸能抑制Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长及肺转移，下调Lewis肺癌小鼠瘤体MVD、VEGF的表达，进而抑制肿瘤生长和转移。

6 调节免疫状态

目前，对中药复方和复方制剂抗肿瘤免疫的研究，主要有免疫细胞活性的变化、免疫分子的表达和肿瘤抗原的表达等方面［19］。卞方［27］等观察不同剂量补肾益肺解毒方对肺癌大鼠脾指数及肺指数的影响，发现中、高剂量组与肺癌对照组相比，脾指数明显提高，肺指数降低，表明补肾益肺解毒方能增强机体的免疫功能。潘玉真［28］等通过检测Lewis肺癌小鼠脾上清液中IFN-γ、IL-10的含量，脾脏NK细胞活性和脾T淋巴细胞亚群，发现柴胡龙牡汤可提高IFN-γ的水平，降低IL-10的优势表达，增强NK细胞活性，提高CD4+水平，显著升高CD4+/CD8+比值，改善机体细胞免疫功能。梁靓靓等［29］观察小柴胡汤和顺铂等药物对Lewis肺癌小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响，结果显示小柴胡汤对免疫器官无损害作用，又能提高宿主免疫功能。张树涌等［30］采用ELISA双抗体夹心法，观察不同剂量复方桂术胶囊作用于肺癌荷瘤小鼠后血清中TNF-α及IFN-γ变化，结果发现复方桂术胶囊既影响荷瘤小鼠外周血清TNF-α及IFN-γ细胞因子水平，又能抑制小鼠肺癌，表明复方桂术胶囊对动物肺癌的抑制作用与增强荷瘤小鼠细胞因子TNF-α及IFN-γ的免疫作用有关。

7 问题与展望

国内开展的中药复方和复方制剂治疗肺癌机理的实验研究，深入地探索了中药多靶点、多途径、多层次作用于肺癌细胞的机理，为进一步研究中药治疗肿瘤的机理和指导临床用药提供了依据，也将对中药复方的应用和推广起到一定的积极作用。由于中药复方和复方制剂有效成分复杂，很难界定发挥作用的具体成分，且影响因素的可控性和实验重复性差;国内大量临床和药理实验研究中所涉及的治法和方药，缺少系统性和一致性。因此，利用计算机模拟技术和分子对接法对显效中药的多靶点抗肿瘤机制进行分析，并针对肺癌的临床常见证型，系统地探索出一系列疗效显著的肿瘤治法和方药，构建一个规范地利用中医药治疗肺癌的理论体系，是我们推进中医药治疗肿瘤事业迈向科学化、系统化和规范化的有效途径之一。

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