晚期非小细胞肺癌血清游离DNA水平变化及意义

邓水秋，欧阳学农，余宗阳，房文铮，王文武，刘志臻

(南京军区福州总医院，福州350025)

肺癌是目前发病率、死亡率最高的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌 NSCLC约占肺癌人群的85%［1］，其中 70%左右患者确诊时已属晚期［2］。研究表明，血循环中肿瘤特征性DNA与肿瘤的发生、发展关系密切。各类肿瘤生长过程中普遍存在血清DNA含量变化。分子生物学研究进一步证实，血清游离DNA与原发肿瘤的基因组DNA具有相同的遗传变异［3］，其变异特征和表达量均与相应肿瘤组织呈正相关，并能反映肿瘤的特征性改变［4］。这些研究视野的拓展和新发现，将为肿瘤的早发现、早诊断提供新的思路和方法［5］。本研究中我们采用实时荧光定量PCR技术检测了60例NSCLC患者血清游离DNA水平，探讨其与NSCLC临床病理生理的关系。

1 资料与方法

1．1 研究对象 入选病例为2008年3月 ～2009年12月南京军区福州总院肿瘤科收治的60例晚期NSCLC患者(NSCLC组)，均经病理学或细胞学检查确诊男47 例，女13 例，年龄(52．6 ±3．4)岁;病理分型为腺癌32例，鳞腺癌21例，其他7例;ⅢB期23例，Ⅳ期37例。无慢性炎症、系统性红斑狼疮、风湿病、肝炎、糖尿病。另筛选健康人群30例(来自南京军区福州总院体检中心)为对照组，男23例，女7例，年龄(48．7±2．9)岁。平素体健，无肿瘤家族史，无高血压、高血脂、糖尿病、冠心病等基础疾病;近1个月无感染史，其年龄、性别、吸烟情况构成比与入组NSCLC患者相应构成比匹配。

1．2 血清DNA水平测定

1．2．1 外周血清标本采集 清晨空腹，静息状态下采肘正中静脉血5 mL置于EDTA管中，常温条件下静置20 min，低温高速离心(4℃，3 000 r/min)10 min，弃下液，吸取血清上层部分于无菌离心管，再次按上述方法离心10 min，再次吸取血清上层部分置于无菌EP冻存管，-80℃冻存。……