基于巯基-烯点击反应制备有机-无机杂化硼酸亲和整体柱用于糖蛋白的选择性富集

杨帆，毛劼，何锡文，陈朗星*，张玉奎，2

(1.南开大学化学学院，天津 300071;2.中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连 116023)

糖蛋白是一类重要的翻译后修饰蛋白，它是由糖链在多肽链上以多种形式共价修饰而成的一类重要的生理活性物质。糖蛋白在生物体内种类繁多，分布广泛，与人体中很多重要的生物学过程密切相关［1，2］。因此，对糖蛋白的研究具有十分重要的生物学意义和临床应用价值。通常糖蛋白在复杂生物体系中的绝对丰度都非常低，高丰度的非糖蛋白的存在会对低丰度的糖蛋白产生干扰和掩盖。虽然生物质谱技术得到了迅速的发展，但是对于低丰度的糖蛋白或糖肽的分析还是无能为力，为了解决这一瓶颈问题，多种糖蛋白或糖肽的分离富集技术应运而生［3-6］。在复杂的生物体系中，通过选择性地分离、富集低丰度糖蛋白来排除高丰度非糖蛋白的干扰是目前糖蛋白鉴定和研究的有效策略。近几年来，硼酸亲和技术在糖蛋白分离富集领域得到了快速的发展。硼酸亲和作用的机理是硼酸基团在碱性条件下与带有顺式二醇(cis-diol)基团的物质共价结合，形成稳定的五或六元环酯结构，当介质的pH 切换为酸性时则可实现可逆的解离［7］。利用硼酸这种可逆结合的性质，硼酸亲和技术已发展成为一种选择性富集含顺式二醇基团化合物的有效提纯手段。

整体柱作为一种新型分离介质，具有制备简单、通透性好、传质快等优点，在生物分离分析中发挥的作用日益增大［8，9］。……