汪勇,高培峰#,赵新颖,2,屈锋*
(1.北京理工大学生命学院,北京 100081;2.北京市理化分析测试中心,北京 100089)
定量蛋白质组学的绝对定量方法需要使用标准内标肽,内标肽的纯度和稳定性等性质影响定量方法的准确度和精确度。同时,蛋白质定量方法研究中也需要保证蛋白质样品的性质稳定和一致。由于多肽及蛋白质的不稳定性在很大程度上影响蛋白质的定量研究,因此快速、有效地评价和表征样品的稳定性是定量蛋白质组学深入研究应该解决的问题之一,样品稳定性也是定量蛋白质组学研究必须关注的基本内容。
血管紧张素II 是人体内重要的体液调节物质,对心血管功能稳定、电解质和体液平衡的维持、血压调节等方面均有重要作用[1]。血管紧张素II 作为标准内标肽和药用多肽时,其纯度、稳定性是质量优劣的关键指标。血管紧张素II的检测多采用高效液相色谱(HPLC)结合免疫化学方法[2]或放射性同位素检测[3]。也有基于高效液相色谱法研究物理和化学因素(如保存条件、温度、pH 值、缓冲溶液)对多肽稳定性的影响[4]。相比HPLC,毛细管电泳(CE)方法速度快,分辨率高,所需样品量少,已有多肽药物[5]和生物样品中血管紧张素及衍生物的分析报道[6],与毛细管电泳相关的毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)[7-9]、毛细管电色谱(CEC)[10]方法也出现在一些多肽的分析中。
糖蛋白是生物体内重要的功能蛋白,也是修饰蛋白质组学的研究热点。作为定量蛋白质组学研究的基础,了解糖蛋白的稳定性是其相关研究的基础和前提。……