小鼠香烟尼古丁骨髓微核毒性实验的研究

吴霏霏，刘翠侠，华 陈，睢凤英（嘉兴学院医学院，浙江 嘉兴 314001）

烟草中含有多种毒性物质，尼古丁是其重要成分之一，它约占烟草生物碱总量的95%。尼古丁在常温下为无色或浅黄色油状液体，极易溶于乙醇[1]。在烟叶中唯有尼古丁会产生耐受、依赖、敏化以及戒断症状[2]。目前关于香烟成分尼古丁对人体的危害主要从宏观的角度进行阐述，缺乏微观水平的毒性学证据。本实验拟通过香烟尼古丁对小鼠骨髓嗜多染红细胞（Polychromatic erythrocytes，PCE）产生微核的影响进行研究，提供香烟尼古丁对人体危害的细胞谁理学证据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：实验动物为健康小白鼠60只，体重25～35 g。由省动物实验中心提供。实验试剂：由市场购得某牌过滤嘴香烟，烤烟型，烟气烟碱量1.12 mg，焦油量17 mg。95%乙醇溶液。顺铂（CDDP）购自伤害恰姆仪器科技有限公司，纯度＞95%，临用前用生理盐水溶解。吉姆萨染色液购自北京索莱宝科技有限公司，临用前调配。

1.2 方法

1.2.1 香烟尼古丁溶液制备：取香烟3支，剥出烟丝并全部投入索氏提取器套筒中[3]。在75 ml 95%乙醇中连续加热虹吸，虹吸6次后停止。分别记录第一次及最后一次的虹吸时间。虹吸结束后把装置改为蒸馏装置，记录蒸馏的时间，镏头77℃，蒸出大部分乙醇，再用25%乙醇75 ml溶解残留物。

1.2.2 动物分组及处理：按照成人重度吸烟者吸烟20支/d计算，小鼠每天吸0.01支，再根据染毒所配置的浓度3支/75 ml，0.25 ml稀释液即含0.01支香烟[4]。将小鼠随机分为6组，10支/组。尼古丁低剂量组：小鼠腹腔注射尼古丁溶液（稀释2倍的原溶液）0.25 ml；尼古丁中剂量组：小鼠腹腔注射尼古丁溶液（稀释1倍的原溶液）0.25 ml；……